手把手教你如何获得光学成像系统的PSF(点扩散函数)——从beads成像到处理图像的经验分享

本文分享了如何获取光学成像系统的点扩散函数(PSF)的实践经验,从购买和制备beads,到实际成像,再到结果处理。通过使用特定的插件在ImageJ上处理Z stack图像,可以计算出系统PSF,从而评估系统性能。文章还提供了插件下载和安装方法。

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首先声明:仅发表个人理解,因为我的课题研究经历更多都是自己搜罗的资源,课题组其他人都没有做这个方向的,所以如果有不对的地方,欢迎评论区讨论。

1、样品的购买和制备

我们会使用beads,俗称荧光小球,它是一个点光源,具有一定的直径,一般是0.1um,0.2um,0.5um,1um等几个直径挡位,在不同的系统下,它能成像到的点扩散函数不一样,这是反应系统质量和参数的一个标准样本。

第一步是购买beads,一般会购买ThermoFisher的荧光小球,链接如下:

荧光微球,适用于多种生物学应用领域 | Thermo Fish

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