荧光寿命成像显微系统的选择

我们所了解的荧光寿命成像显微镜（FLIM）是测量荧光衰减的空间分布，可以在时域或频域中实现。是根据光检测器的类型和所采用的采集方法，每种方法都有优点和缺点。

术语“荧光”通常被用作光致发光的同义词，尽管发光实际上包括荧光和磷光。这两个术语都描述了以较高能量吸收光并随后以较低能量再发射的过程。在这篇文章中，术语荧光和光致发光将被认为是可互换的。根据染料的不同，光子能量的吸收不是瞬间的。相反，吸收需要有限的时间，这也适用于发射过程，因为染料在激发停止后继续发光一小段时间。用衰变率或寿命来表示，这种发射衰变过程是染料及其特定光谱行为的基本特征。

通常，荧光寿命是指分子停留在激发态的时间。可以通过观察足够大量的激发-发射事件集合来测量荧光染料的典型寿命。我们可以测量图像中所有像素的典型寿命，并将这些数字记入数组元素，那就是荧光寿命成像。

而FLIM是指“时间相关单光子计数”TCSPC，它与多光子共聚焦显微镜兼容。用光脉冲照射样本，测量发射光子到达的时间。为重建典型的寿命，这种测量要在同一样本位置重复几次。需要测量几百个事件才能达到大约10%的准确度。然后将数据按时间分组放入直方图中。然后对该直方图中随时间出现的衰变进行数学拟合，并直接提供所需的荧光寿命。

市面上，能提供荧光寿命成像显微系统的国内外厂商众多，在产品性能和价格方面均参差不齐，用户选择成难题。下面我们重点推荐几款常应用在生物，化学，材料等科学研究的荧光寿命成像仪器：

▶ 单光子计数共聚焦显微镜Luminosa

Luminosa是一款将超高数据质量与超简日常操作相结合的单光子计数共聚焦显微镜。 它可以轻松集成到任何研究人员的“工具箱”中，并成为开始探索使用时间分辨荧光方法科学家以及想要突破极限专家的省时、可靠的伙伴。它是每个人都可以真正信赖的显微镜系统。

▶ 单分子时间分辨共聚焦荧光显微系统MicoTime200

它是一款功能功能强大的设备可用于荧光寿命成像（FLIM，rapidFLIM）、FLIM/FRET、厚组织FLIM、PIE/FCS/FCCS、双聚集双聚焦FCS、扫描FCS、各向异性、单脉冲荧光分析、AFM/FLIM联用或深紫外激发-探测等方法，分析低至单分子尺度下的多种参数。通过新的MIcroTime200 STED附件，甚至可以实现低至50nm的高分辨率成像。通过基于后口的激发光路，可以实现二维载流子扩散成像。

▶ 正置时间分辨荧光显微系统MicroTime 100

MicroTime100是研究固态样品（如晶圆，半导体或太阳能电池材料）时间分辨光致发光的理想工具。整套系统基于常见的正置显微镜构建，可以用于观测各种规格大小的样品。同时，MicroTime 100可以集成厘米或微米级别分辨率的手动扫描方式和3D压电扫描台。荧光寿命可以从ps至ms 级别。

▶ 共聚焦显微镜FLIM/FCS升级套件 LSM Upgrade Kit

激光扫描共聚焦显微镜（LSM）是生物化学，细胞生物学和其他相关生命科学领域中广泛使用的工具。 通过使用时间分辨技术，可以进一步增强这些显微镜的功能。

如需了解以上仪器更多的应用信息，请随时联系我们。