佐剂（adjuvant）是指预先或与抗原同时注入体内，能够增强机体对该抗原免疫应答的非特异性免疫增强性物质。目前最常用于动物实验的佐剂是弗氏完全佐剂（complete Freund's adjuvant, CFA）和弗氏不完全佐剂（incomplete Freund's adjuvant, IFA）。在进行人工免疫诱导实验中，常将佐剂与抗原溶液按比例混合进行乳化，以增强抗原诱导机体发生的免疫反应，获得高效价抗体。
佐剂的作用机制主要为：
（1）改变抗原物理性状，延缓抗原降解，延长抗原在体内潴留时间。
（2）刺激抗原提呈细胞，增强其对抗原的加工和提呈。
（3）刺激淋巴细胞的增殖分化，增强和扩大免疫应答效应。
作为疫苗制备的关键环节，抗原乳化是将佐剂与抗原溶液按比例混合，制备成 “油包水”乳剂的过程， 其作用机制是在有油和水的混合物中加入乳化剂（本实验为羊毛脂）后，进行机械混合，
一方面，乳化剂的亲水基结合水，亲油基结合油，使油-水两相之间形成一层致密的介面膜，降低了油与水之间的接口张力形成小液滴，同时对液滴起保护作用；
另一方面，由于乳化过程中吸附和摩擦等作用使得液滴表面带电，带电液滴在接口的两侧会形成双电层结构，其排斥作用使得小液滴难以聚集，从而提高了乳化液的稳定性。理想的乳化能增强机体的免疫应答，提高免疫抗原的保护效果。
因此，乳化过程十分重要，而佐剂、抗原溶剂、时间、温度、乳化器及操作技巧等每个环节的变化，都会影响乳化效果。
目前已有报道，去离子水和 PBS 缓冲液都可以作为抗原乳化的溶剂，且在乳化过程中不改变抗原的结构和免疫原性。 本实验结果显示，以去离子水为溶剂进行 GPI 多肽抗原和 CFA 乳化，是一个缓慢而温和的过程，乳化时间相对较长，便于人工控制，但冰浴乳化操作较繁琐。以 PBS 缓冲液为溶剂进行乳化，则是一个快速的过程，乳化完成时间较短（2～5 min），容易乳化过度，难以人工控制。这可能是由于 PBS 缓冲液中的磷酸根基团之间的静电斥力作用，增强了乳化液的稳定性 , 从而加速了完全乳化的过程。如果继续乳化（时间较短），PBS 缓冲液中 Na+ 、K+ 离子与磷酸根基团充分接触，压缩双电层，使其厚度变薄，乳状液的稳定遭到破坏，小液滴聚集，乳剂粘度增加，导致乳化过度 。 实验结果提示，若在可控制乳化程度的前提下加快乳化速度，可以尝试用无菌水为主要溶剂，添加少量或低浓度的 PBS 缓冲液作为辅助溶剂。至于无菌水与添加 PBS 缓冲液的比例和条件，还需要进一步试验进行摸索。
此外，乳化器的材质和乳化过程的温度也很重要。如果选用一次性塑料注射器，因其封闭良好、不易漏液更适用于少量的或昂贵的抗原乳化，但其摩擦阻力较大，乳化时间越长越难推动；有时还可能因为样品量大，乳化时间长出现掉色现象，使溶液变黑，影响实验效果。玻璃注射器克服了塑料的材质问题，且磨砂针芯有利于抗原乳化，但不足是玻璃注射器易漏，容易造成抗原的浪费。此外，低温条件虽然使乳化速度变慢，却能防止抗原变性，所以用注射器推拉乳化抗原的操作要在冰浴条件下进行。
综上所述，抗原乳化过程中，需要综合考虑抗原溶剂、乳化程度的可控性、乳化器材质、环境温度等综合因素，方能得到最佳的乳化效果：既保持抗原的稳定性，又延长抗原在动物体内的时间，提高免疫原性，成功造模。
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仪器档案：
名称：全自动多通道抗原乳化仪
产地：中国
应用领域及作用：应用于抗体制备的抗原乳化过程，可自动将抗原与福氏佐剂制成乳剂...
适用：
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