仪器简介
Amaxa Nucleofector技术是 Lonza(原Amaxa)公司的专利创新技术,它综合应用传统的电穿孔技术及细胞特异性细胞核转染液,通过调整优化的电转参数(内存转染程序),直接把外源基因导入原代细胞及细胞系的细胞浆和细胞核中。
4D-Nucleofector电转耗材内的电极采用高分子材料,能有效防止电转时金属离子的释放损伤细胞,从而提高细胞存活率。
仪器特点
不依赖细胞的有丝分裂,适用于悬浮细胞、原代细胞等难转染细胞。
高转染效率,直接将外源基因转入核内。
可转染DNA、RNA或siRNA。
采用高分子导电聚合物,取代金属电极,提高了细胞存活率。
最广泛细胞类型,全球共享的细胞转染数据库不断扩大。
电转模式
X-Unit(电转杯):细胞悬液电转,电转体积100μl
X-Unit(16联管):细胞悬液电转,电转体积20μl
Y-Unit:细胞贴壁电转,规格24 well plate
样品准备指南
细胞
细胞状态较佳,死细胞少。
X-Unit:细胞于电转前1小时换新鲜培养基。贴壁细胞消化、离心后重悬于培养基中。
电转hESCs或hiPSCs,细胞于电转前1小时换新鲜培养基+Y27632(终浓度10μM)。贴壁细胞消化、离心后重悬于培养基中。
Y-Unit:贴壁细胞密度约50%~80%满。细胞于电转前1小时换新鲜培养基。
质粒
纯化后的质粒,260/280应在1.8左右。质粒浓度需1μg/μl以上。
在生物安全柜或超净台中,使用灭菌后的ddH2O溶解质粒。
北京泽平科技有限责任公司成立于2003年3月,专营各进口生物试剂,科学仪器,实验室消耗品,化工原料及医药中间体为主的新技术产品贸易公司。
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- Rainin 瑞宁 (北京一级代理)
- MP (北京一级代理)
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- 亿康基因 (北京一级代理)
- Royacel 荣晔 (北京一级代理)
- Bachem 巴亨 (中国一级代理)
- Ammex 爱马斯 (北京一级代理)
- G-Rex (中国一级代理)
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