质粒是独立于宿主染色体DNA,可以进行自主复制的小型、环状、闭合的DNA片段。它们主要存在于细菌中,也存在于古细菌和真核生物,如酵母和植物中。在自然界中,质粒能为宿主提供一个或多个功能,如对抗生素的抗性、降解功能以及某种毒性功能。
那么,你知道质粒有哪些分类和用途吗?
所有的天然质粒都包含一个复制原点(它控制质粒的宿主范围和拷贝数),并且包括一个对生存有利的基因,如抗生素抗性基因。相反,在实验室中使用的质粒通常是人工的,旨在将外来的DNA引入另一个细胞。实验室构建的质粒至少有一个复制原点、选择标记和克隆位点。质粒在细胞内自我复制的能力和易于修饰的特性使它们成为生命科学家经常使用的工具。下面,我们来具体看看质粒有哪些分类和用途吧!
1.Cloning Plasmids 克隆质粒:用于促进DNA片段的克隆,克隆载体一般都非常简单,通常只包含细菌抗性基因、复制起点和多克隆位点。
2.Expression Plasmids 表达质粒:用于基因表达(基因功能的研究)。表达载体必须包含启动子、转录终止子序列和插入基因。启动子驱动插入的DNA转录生成RNA,合成的RNA上的终止子序列发出停止转录过程的信号。
3.Gene Knock-Down Plasmids 基因敲减质粒:用于减少内源基因的表达,通过表达靶向目的基因mRNA的shRNA来实现,这些质粒具有可以驱动短RNA表达的启动子。
4.Genome Engineering Plasmids 基因工程质粒:用于靶向和编辑基因组,一般是利用 CRISPR技术完成。
5.Reporter Plasmids 报告质粒:用于研究遗传元件的功能,这些质粒往往包含一个报告基因(例如,荧光素酶或GFP),可以提供遗传元件活性的读数。
6.Viral Plasmids 病毒质粒:通过修饰病毒基因组,有效地将遗传物质递送到靶细胞中。可以使用这些质粒来制造病毒颗粒,例如逆转录病毒、慢病毒、AAV或腺病毒颗粒,从而可以高效地感染靶细胞。
细胞实验,质粒为王。如果您想做过表达、沉默、敲除、亚细胞定位、蛋白功能、基因结构域验证、上下游功能验证、病毒侵染、蛋白提取等等,质粒都能帮您一一实现。以上是根据质粒有哪些分类和用途进行相关论述的,希望对大家有所帮助!