作为培养基中最常见的添加剂,胎牛血清中含有的生长因子、激素可以为细胞的生长繁殖提供必要的营养成分。在细胞培养实验中,所使用的试剂、器具都需要经过严格的灭菌操作,保证整个实验的顺利进行。那么胎牛血清需要灭活吗?胎牛血清的灭活方法你知道哪些?所有的细胞实验都需要对胎牛血清进行灭活么?带着这些疑问,让我们一起走进胎牛血清灭活的世界!
胎牛血清的常见灭活方法有:
热灭活:首先准备一个与血清瓶同规格的对照瓶,接着,在对照瓶中加入与血清同体积的水量,其次,在对照瓶中插2-3支经挑选的温度计(以保证测试温度的准确性)放入水浴箱中,接通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃,接着将血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时,定时30分钟。时间到即灭活完成。
伽玛射线灭活:将含有胎牛血清的样本置于辐射装置中接受一定剂量的伽玛射线照射。伽玛射线具有很高的贯穿能力,能有效破坏DNA双螺旋结构,阻断病毒繁殖周期。适用于需要长时间保持无菌状态下的胎牛血清样品处理。
超高压灭菌法:使用超高压设备对含有胎牛血清的样本施加高压条件,通常为100至300兆帕斯卡范围之间。高压环境导致微生物细胞壁完整性受损、酶失活及遗传物质损伤,从而实现高效且安全地消灭潜在病原体目的。对于需严格控制感染风险场合下之应用尤为适用。
除了上述灭活方法以外,胎牛血清的灭火方法还有β-丙内酯灭活、甲醛灭活、微波灭活等。
是所有的细胞实验都需要对胎牛血清进行灭活么?其实并不是这样的。有实验研究表明,经热灭活过的胎牛血清培养的细胞有三种结果;一部分细胞出现负增长,一部分出现正增长,一部分没有影响。由此我们知道,并不是所有的细胞需要使用经热灭活处理的胎牛血清。在细胞实验中,我们要根据细胞类型、实验设计及时的对实验用量进行调整,以达到细胞生长繁殖所需要的生理环境。