β-淀粉样蛋白(1-40)和β-淀粉状蛋白(1-42)是β-淀粉类蛋白的两个主要C末端变体。这些β-淀粉样肽在阿尔茨海默病的大脑中进行分泌后聚集和沉积。这是荧光(FAM)标记的ß-淀粉样蛋白(1-40),Abs/Em=494/521nm。FAM由于其光稳定性和化学稳定性而优于FITC。
荧光Aβ42(FAM标记的人β-淀粉样蛋白(1-42)和Fluor™488标记的β-淀粉状蛋白(1-42))或扰频Aβ42的内皮单层(FAM标签的扰频β-淀粉类蛋白(1-40))(1-100μM)的顶端-基底外侧交换在细胞单层形成过程中随时间(在存在或不存在Aβ24的情况下超过120分钟)的跨内皮电阻(TEER)中进行监测。人β-淀粉样蛋白(1-24)(1μM)导致H-Aβ42滞留,从而减少其通过血脑屏障的流出,从而阻止Aβ42清除的有效机制。
体外血脑屏障模型用于研究FAM标记或488偶联的H-Aβ42通过内皮细胞单层的情况。在细胞插入物的顶端添加荧光标记的H-Aβ42(FAM标记的人β-淀粉样蛋白(1-42)或Fluor™488标记的β-淀粉状蛋白(1-42))会导致有效的血脑屏障交叉,FAM标记混乱的β-淀粉酶(1-42)。
引用文献:
1, Preparation of fluorescently-labeled amyloid-beta peptide assemblies: the effect of fluorophore conjugation on structure and function
J Mol Recognit. 2009 Sep-Oct;22(5):403-13. doi: 10.1002/jmr.948.
L M Jungbauer 1, C Yu, K J Laxton, M J LaDu
2, Amyloid-β 1-24 C-terminal truncated fragment promotes amyloid-β 1-42 aggregate formation in the healthy brain
Acta Neuropathol Commun. 2016 Oct 10;4(1):110. doi: 10.1186/s40478-016-0381-9.
Sonia Mazzitelli, Fabia Filipello, Marco Rasile, Eliana Lauranzano, Chiara Starvaggi-Cucuzza, Matteo Tamborini, Davide Pozzi, Isabella Barajon, Toni Giorgino, Antonino Natalello, Michela Matteoli.
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