FISH(荧光原位杂交)探针是一种用于细胞或组织样本中检测特定核酸序列存在和定位的技术。这些探针通常由荧光标记的核酸序列组成,用于与待检测的目标DNA或RNA互补配对。
FISH的基本原理是利用已知单链核酸修饰的荧光基团为探针,根据碱基互补原则,与待检物体中未知的单链核酸特异性结合形成双链结构,这样就成功标记了样品,该探针沿着染色体纵轴呈线性排列,所以可以将探针直接与染色体进行杂交从而实现特定基因在染色体上的定位。FISH 技术是研究端粒的常用技术。探针的大小对于FISH 技术重要,因为链长的探针比链短的探针特异性差,所以互补的DNA或RNA(一般为10~25核苷酸)短链更常用于FISH 探针的制备。
FISH 也可以用于检测和定位特定细胞、循环肿瘤细胞和组织样本中的核糖体RNA (lncRNA,mRNA和 miRNA),而且发展了基于FISH 技术利用寡核苷酸探针定位RNA (rRNA)的应用。虽然也可以使用荧光标记抗体识别单一微生物细胞,但因固相合成寡核苷酸方法简单,成本低廉,使其成为识别细胞的首选工具。rRNA基因序列,使得能够针对寡核苷酸设计出各种探针。
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以上资料来自昊然小编MSQ.2023.11.27