RNA探针定制，荧光原位杂交(FISH)技术基本原理介绍

荧光原位杂交(FISH)是一种分子遗传学技术，该技术主要利用荧光探针与具有高度的序列互补性的部分染色体结合。FISH技术是由20世界80年代早期的生物医学研究人员，为了检测和定位染色体上特定DNA序列的存在或缺失而开发的，并实现了对果蝇染色体的快速标记，证实了该方法的可行性。而荧光显微镜可以用来找出荧光探针与染色体的结合点。我们通常利用FISH寻找DNA 上的某些特征，并用于遗传咨询、医学和物种鉴定等方面。FISH 也可以用于检测和定位特定细胞、循环肿瘤细胞和组织样本中的核糖体RNA (lncRNA，mRNA和 miRNA)，而且发展了基于FISH 技术利用寡核苷酸探针定位RNA （rRNA）的应用。虽然也可以使用荧光标记抗体识别单一微生物细胞，但因固相合成寡核苷酸方法简单，成本低廉，使其成为识别细胞的首选工具。rRNA基因序列，使得能够针对寡核苷酸设计出各种探针。

FISH的基本原理是利用已知单链核酸修饰的荧光基团为探针，根据碱基互补原则，与待检物体中未知的单链核酸特异性结合形成双链结构，这样就成功标记了样品，该探针沿着染色体纵轴呈线性排列，所以可以将探针直接与染色体进行杂交从而实现特定基因在染色体上的定位。FISH 技术是研究端粒的常用技术。探针的大小对于FISH 技术重要,因为链长的探针比链短的探针特异性差,所以互补的DNA或RNA(一般为10～25核苷酸）短链更常用于FISH 探针的制备。

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以上资料来自昊然小编MSQ.2023.11.27