青蒿琥酯是STAT-3 和输出蛋白 1 (EXP1) 的抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

中文名：青蒿琥酯

CAS：88495-63-0

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：青蒿琥酯是STAT-3 和输出蛋白 1 (EXP1) 的抑制剂。 IC50 和目标：STAT-3[1]、EXP1[2] 

体外：Artesunate 是 STAT-3[1] 和输出蛋白 1 (EXP1)[2] 的抑制剂。青蒿琥酯处理 24 小时会导致两种细胞系中活性氧 (ROS) 水平的显着增加，且呈剂量依赖性。此外，蛋白质印迹显示，当用较高剂量范围的青蒿琥酯处理癌细胞 24 小时时，γ-H2AX 的水平显着升高。 Artesunate 还显示出对 A2780 和 HO8910 细胞中 RAD51 水平的时间依赖性影响。在两种类型的非恶性细胞（正常人成纤维细胞和永生化上皮细胞 FTE-187）中，RAD51 的水平不会被青蒿琥酯改变。在 A2780 细胞中，RAD51 mRNA 的水平确实通过添加青蒿琥酯以剂量依赖性方式降低。相应地，RAD51 的启动子活性被青蒿琥酯显着抑制。相反，H8910细胞中RAD51 mRNA水平不受青蒿琥酯[3]的影响。

体内：接受青蒿琥酯和顺铂联合治疗的组的肿瘤生长显着减少(P<0.01)。相比之下，单独使用青蒿琥酯对两种细胞系的肿瘤异种移植物的生长没有显着影响[3]。

激酶试验：用青蒿琥酯处理 24 小时后，收获细胞并在 1×细胞裂解缓冲液中裂解。通过 SDS-PAGE 分离 15 至 25 μg 的总蛋白并转移到聚偏二氟乙烯 (PVDF) 膜上。膜在室温下用 5% 脱脂牛奶封闭 1 至 2 小时，然后用一抗探测并在 4°C 下孵育过夜。用 TBS-T 充分清洗后，将膜与适当的 HRP 标记的二抗在室温下孵育 1 小时，然后用 Western ECL 增强的鲁米诺试剂进行检测 [3]。

细胞试验：A2780 和 HO8910 细胞在 RPMI 1640、DMEM 中的正常人成纤维细胞 (NHF) 和 M199 中的 FTE-187 中培养，并补充有 10% 胎牛血清、100 单位/mL 青霉素和 100 mg/mL 链霉素。所有细胞均在 95% 空气和 5% CO2 的潮湿气氛中孵育。青蒿琥酯以 0、5、10、25 或 50 µg/mL 的浓度应用于培养细胞，持续不同时间。测定青蒿琥酯处理后活性氧 (ROS) 的产生。简而言之，用青蒿琥酯处理后，向细胞加载 5 μM CM-H2DCFDA，并在 37°C 下孵育 20 分钟。使用保存液重悬细胞并使用 FACSCanto II 进行分析。氧化 CM-H2DCFDA 的峰值激发波长为 490 nm，发射波长为 530 nm[3]。

动物体内实验:使用四至六周大的雌性无胸腺裸鼠(BALB/c，nu/nu)。收获A2780和HO8910细胞并重悬于0.1ml PBS中，将5×106细胞/0.2mL皮下注射到小鼠左侧腹股沟区域。两周后，携带肿瘤的小鼠（A2780 和 HO8910 约为 70 mm3）被随机分为 4 组。青蒿琥酯每天通过腹膜内注射给药，剂量为 50 mg/kg，持续 16 天。每隔一天监测肿瘤生长。肿瘤体积由公式1/2a×b2确定，其中a是长直径(mm)，b是短直径(mm)[3]。

 参考详情： www.medchemexpress.cn/Artesunate.html

参考文献：

[1]. Ilamathi M, et al. Artesunate as an Anti-Cancer Agent Targets Stat-3 and Favorably Suppresses Hepatocellular Carcinoma. Curr Top Med Chem. 2016;16(22):2453-63.

[2]. Lisewski AM, et al. Supergenomic network compression and the discovery of EXP1 as a glutathione transferase inhibited by artesunate. Cell. 2014 Aug 14;158(4):916-928.[3]. Wang B, et al. Artesunate sensitizes ovarian cancer cells to cisplatin by downregulating RAD51. Cancer Biol Ther. 2015;16(10):1548-56.