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Sulfo-Cy5 NHS ester是一种活性荧光染料,它的NHS酯官能团可与生物分子中的氨基(-NH2)反应,形成稳定的共价酰胺键,从而实现荧光标记。在标记的过程中,Sulfo-Cy5 NHS ester的NHS酯官能团会与生物分子中的氨基(-NH2)发生反应,从而标记荧光染料到生物分子上。
在实验室中,Sulfo-Cy5 NHS ester可用于将荧光标记共价地连接到生物大分子(如蛋白质、抗体、核酸等)的氨基(-NH2)上,从而实现荧光标记。这个过程称为氨基化反应,主要包括以下步骤:
1. 活化:首先将生物大分子中的氨基进行活化,通常使用EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide) 和 NHS (N-hydroxysuccinimide)等试剂来实现。EDC可以将氨基与NHS形成高度活化的酰氧化物中间体。
2. 反应:将活化的生物大分子与Sulfo-Cy5 NHS ester混合,使Sulfo-Cy5 NHS ester中的NHS酯官能团与生物大分子中的活化氨基发生反应。这个反应会形成稳定的共价酰胺键,并将Sulfo-Cy5染料标记到生物大分子上。
3. 去除未反应的染料:反应后需要对反应混合物进行处理,通常采用凝胶过滤、凝胶电泳或者柱层析等方法去除未反应的Sulfo-Cy5 NHS ester和其他副产物,以得到纯净的标记产物。
通过氨基化反应将Sulfo-Cy5 NHS ester与生物大分子的氨基反应,可以实现对生物大分子的荧光标记。标记后的生物大分子可以用于细胞成像、蛋白质相互作用研究、荧光原位杂交等生物学研究应用。荧光标记可以帮助研究人员观察和研究生物大分子在细胞或生物体内的分布、定位和相互作用,为生物学研究提供工具。
Sulfo-CY3 tetrazine
CY5 tetrazine
Cy5-ConcanavalinA
Cy3-Concanavalin A
ICG-Dextran
RB-Dextran
Sulfo-CY3 DBCO
CY5 DBCO
Sulfo-CY5 DBCO
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