博奥龙QuickShuttle转染试剂常见问题解答

1,我们有哪些货号?使用上有哪些区别?

产品名称

货号

产品用途

1

QuickShuttle-Basic

KX0110041

基础型转染试剂,适用于大多数哺乳动物细胞系,可用于原代细胞和二倍体细胞,≈Lipo 2000

2

QuickShuttle-Enhanced

KX0110042

增强型转染试剂,适用于大多数哺乳动物细胞系,专用于难转细胞系,≈Lipo 3000

3

QuickShuttle-Superfast

KX0110043

超快型转染试剂,可立传立转:细胞消化和转染同时进行

4

QuickShuttle-293

KX0110044

293细胞专用转染试剂,专用于各种293细胞,可立传立转

5

QuickShuttle-Hela

KX0110045

Hela细胞专用转染试剂,专用于Hela细胞,可立传立转

6

QuickShuttle-BHK-21

KX0110046

BHK-21细胞专用转染试剂,专用于BHK-21细胞,可立传立转

2,转染试剂种类如此多,我该选择哪一款呢?

首先,基础型转染适合转染常规的哺乳动物细胞,对应Lipo2000;增强型适合转染难转细胞,对应Lipo3000。所以,对于有其他转染试剂使用经验的客户,可以根据现阶段转染试剂的转染效率判断,转染效率低的用增强型,高的可以用基础型。

其次,虽然增强型由于其较高的转染效率及广泛的适用性,成为了我们的明星产品,但293系列推荐使用293细胞专用型和基础型,不推荐增强型或超快型。因为,后两款转染试剂为了获得更好的转染效率,毒性比基础型的要大,所以一部分客户在使用增强型转染试剂转染293时候,会有细胞的死亡。

最后,我们现在在更多的搜集客户转染细胞的种类,并会做实时更新,从而让大家更方便的看到那种细胞使用过哪种转染试剂。

当然,对于仍无法确认的客户,可以先申请我们的试用装测试,再进行订购。

3,什么叫预贴壁?立传立转又是什么概念?

预贴壁是即为贴壁细胞正常传代的过程。一般提前一天传代,第二天再加入转染复合物。

将转染复合物直接加入新鲜消化收集的细胞中并传代,48-72小时候看转染效果,无需等待18-24h的细胞贴壁,即为立传立转。

4,QuickShuttle转染试剂为什么推出了非立传立转的基础型与增强型?

主要是由于前期收到了很多客户实验失败的反馈,经过实验室的判断,发现是由于操作不规范造成:细胞先用胰酶消化,在没有完全消化的情况下,使用移液管反复吹打细胞,会对细胞膜造成严重的伤害。QuickShuttle转染试剂的毒性极低,但是在细胞膜受到伤害的情况下,细胞毒性会被放大,从而导致细胞的死亡。因此,我们推出的基础型与增强型,客户的细胞需要提前一天传代预贴壁,第二天做转染。但是基础型与增强型转染试剂,仍保留了QuickShuttle转染试剂的一分钟快速转染与无需换液的特点。

备注:如果按照说明书的操作,实验已经成功了,基础性和增强型其实也是可以尝试下立传立转的哦!

5,为了避免实验失败,在初次进行立传立转操作的时有什么注意事项?

在初次使用QuickShuttle转染试剂做立传立转的时候,我们一般建议先设置非立传立转的对照组,即提前一天做传代贴壁处理,第二天再转染。在对照组没有问题后,再去尝试做立传立转的概念。

做立传立转的时候,胰酶消化的时间可以稍微延长,尽可能减少一些移液管吹打或吹打温柔一些从而减少对细胞的细胞膜造成的物理伤害。

6,贴壁细胞选哪个转染试剂?悬浮细胞选哪个转染试剂?

basic、Enhanced、superfast都可以用于贴壁细胞;悬浮细胞转染建议采用超快型或者对应的专用型,使用方法没有特别要求,按照咱们常规操作即可。

7,原代细胞与干细胞是否可以转染?

原代细胞与干细胞是可以转染的,但是要从基础型转染试剂开始尝试,我们有客户转染小鼠胚胎干细胞效果很好。因为原代细胞与干细胞细胞比较脆弱,对转染试剂的毒性比较敏感,基础型转染试剂毒性低,可以建议客户先测试基础型转染试剂,再基础型转染试剂转染不好的情况下再测试增强型转染试剂,当然如果样品比较多,也可以同时测试。

8, 转染试剂可以转染多少细胞呢?

可以参考以下表格进行估算

 9,我之前适用过很多转染试剂都失败了,你们的增强型效果会更好吗?

我们的转染试剂的确不是万能的,因为操作、细胞状态、细胞种类、质粒的质量、操作手法,以及转染试剂的原理不同,等各种因素影响,有些细胞我们转染的很好,但有些细胞效率会偏低,所以我们可以提供免费试用装进行测试

也有些细胞的确会比较难转,所以可以考虑改为用包装后的病毒做转染

10QuickShuttle转染试剂适合转染RNA、siRNA吗?

理论上是可以的,但是现阶段的确没有特别多的数据,欢迎申请试用装测试反馈。

11,病毒包装如何使用QuickShuttle转染试剂?

欢迎联系我们获取《QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书》

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