同学:
最近在为买Myc抗体发愁,真害怕买错了,不但损失几千块钱,更害怕实验数据出问题!c-Myc和Myc-Tag区别是什么呢?
龙宝:
c-Myc 基因
是 Myc 基因家族的重要成员之一,他与多种肿瘤发生发展有关, Myc 是一个比较大的蛋白,人的 c-Myc 蛋白全长~454 aa,Human Swissprot No. P01106,分子量在 50-70 kDa。
Myc 标签(Myc Tag)
由来源于人 Myc 蛋白 E424-L433 的十个氨基酸(EQKLISEEDL)组成, 该肽段分子量为 1.2 KDa。利用重组 DNA 技术, 它可以连接在融合蛋白的 N 端或者 C 端, 有利于对目的蛋白进行纯化和检测。Anti-Myc Tag抗体可以用于检测和 Myc 标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位, 也可以用于Myc Tag融合表达蛋白的纯化、定性或定量检测。
同学:
那Myc抗体和Myc-Tag抗体怎么选?
龙宝:
主要考虑你要检测的是内源天然蛋白,还是检测含有Myc标签的重组蛋白。
同学:
可是你前面说,Myc-Tag是源自于c-Myc设计的一段序列,那Myc-Tag抗体是不是也可以检测细胞中分泌的c-Myc?我直接买Myc-Tag抗体是否可以一劳永逸?!
龙宝:
理论上是如此的,但实际上部分Myc-Tag抗体在检测天然的c-Myc蛋白时,遇到了信号弱的问题,造成此问题的原因有以下几点:
①抗Myc标签的抗体是经过优化来高效识别并结合Myc标签序列的。这些抗体在实际应用中可能对完整的c-Myc蛋白识别不如对Myc标签识别那么高效。
②c-Myc蛋白的三维结构可能会掩盖Myc标签序列所在的区域,导致Myc-Tag抗体无法有效结合。
③内源性c-Myc蛋白的表达水平和分泌状态可能不如实验中人工添加的Myc标签融合蛋白那么高,导致检测的信号较弱或被背景信号掩盖。
甚至有些Myc-Tag抗体并未评价检测天然c-Myc蛋白的效果,所以,为了避免不适合的风险,建议还是根据具体需求选择对应的抗体。
如需检测human样本的细胞或组织裂解液中的内源的c-Myc蛋白,可以查看我们博奥龙的RM4176是否满足需求:
名称:c-Myc (9U18) Rabbit Monoclonal Antibody
应用:WB,IHC,FC,IP,ICC/IF
种属:Human,Mouse,Rat
如需检测重组蛋白中的Myc标签,可以查看我们博奥龙的B1002或BDAA0196是否满足需求:
名称:Myc-Tag (3E8) Mouse Monoclonal Antibody
应用:WB,IP,IF,Elisa
种属:Species independent
名称:Recombinant Myc-Tag Monoclonal Antibody(2G4), HRP Conjugated
应用:WB,ELISA
种属:Species independent
优势:超高性价比!WB稀释比高达1:10万的HRP直标抗体
Tips:
Species independent即不限种属。
为什么不限种属?
这主要归功于Myc-Tag短小的序列和高度保守的表位,使得Myc-Tag抗体能够跨多种生物体系通用。只要重组蛋白融合了Myc-Tag,Myc-Tag抗体都可以识别并结合到这个标签上。