生物素标记转铁蛋白,Biotin-Transferrin,转铁蛋白-生物素标记的材料准备、标记步骤、应用和保存!

描述:

将生物素(biotin)标记到转铁蛋白上是一种常用的方法,用于生物分析和免疫检测。生物素标记的转铁蛋白可以用于生物素-双抗体夹心法检测铁蛋白在生物样本中的存在和水平。以下是一般的标记步骤:

材料准备

  1. 转铁蛋白:*的转铁蛋白,确保其纯度和活性。
  2. 生物素-NHS:生物素和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)偶联的混合物。
  3. 磷酸盐缓冲液(PBS):用于制备标记反应的缓冲液。
  4. 其他试剂和耗材:如透析袋、搅拌器等。

标记步骤

  1. 准备转铁蛋白溶液:将转铁蛋白溶解在PBS缓冲液中,确保其浓度适合标记反应。
  2. 制备生物素-NHS溶液:将生物素-NHS溶解在适量的溶剂中,制备成适当浓度的溶液。
  3. 标记反应:将适量的生物素-NHS溶液缓慢加入到转铁蛋白溶液中,同时轻轻搅拌。
  4. 孵育:在室温下孵育一段时间,通常为1-2小时,以促进生物素与转铁蛋白的结合。
  5. 去除未反应的生物素-NHS:使用透析袋或凝胶过滤柱去除未反应的生物素-NHS。
  6. 纯度和活性检测:检测标记后的生物素-转铁蛋白的纯度和活性,确保其可以用于后续实验。

应用和保存

标记后的生物素-转铁蛋白可用于生物素-双抗体夹心法检测铁蛋白在生物样本中的存在和水平。存储时应避光、冷藏保存,以保持其稳定性和活性。这种方法可以用于研究铁蛋白在细胞和组织中的分布和功能,以及铁代谢相关疾病的诊断和*方法的开发。

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