RBITC-Con A,四甲基罗丹明标记刀豆球蛋白A,RBITC-ConcanavalinA
描述:
四甲基罗丹明标记刀豆球蛋白A(Tetramethylrhodamine-labeled Concanavalin A, TMR-ConA)是一种用于荧光成像和糖蛋白研究的生物化学工具。刀豆球蛋白A(Concanavalin A, ConA)是一种特异性识别和结合糖类分子的植物凝集素,四甲基罗丹明(TMR)是一种常用的荧光染料。通过标记ConA,可以在荧光显微镜下观察细胞或组织中的糖类分布。
制备步骤:
- 材料准备: 刀豆球蛋白A (ConA),四甲基罗丹明染料(如Tetramethylrhodamine isothiocyanate, TMR-ITC),缓冲液(如PBS),去离子水,透析袋。
- ConA溶解: 将ConA溶解在PBS中,配制成适当浓度的溶液。
- TMR溶解: 将TMR染料溶解在DMSO或乙醇中,制成高浓度溶液。
- 标记反应: 将TMR溶液缓慢加入ConA溶液中,维持pH在7.5左右,室温反应数小时以确保充分标记。
- 透析纯化: 将反应混合物装入透析袋中,用PBS或去离子水透析,去除未反应的TMR染料。透析时间通常为过夜或更长时间。
- 储存: 透析完成后,收集透析袋中的TMR-ConA溶液,分装后低温保存(如-20°C),防止降解。
应用: TMR-ConA主要用于研究细胞膜上的糖蛋白和糖类结构。由于TMR具有强烈的荧光特性,标记后的ConA在荧光显微镜下可以清晰地观察到糖类分子的分布和动态变化。这在细胞生物学、糖生物学以及相关医学研究中具有重要意义。
这种工具在科研和诊断领域广泛应用,帮助研究人员深入理解糖类在生物过程中的作用。
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