刀豆球蛋白A-琼脂糖珠 Concanavalin A-Sepharose

刀豆球蛋白A-琼脂糖珠        Concanavalin A-Sepharose                 

描述:

刀豆球蛋白A-琼脂糖珠(Concanavalin A-Agarose Beads, ConA-Agarose Beads)是一种通过将刀豆球蛋白A(ConA)偶联到琼脂糖珠上的生物试剂。ConA是一种植物凝集素,能够特异性识别和结合糖类分子,而琼脂糖珠提供了一个稳定的基质,使其在生物分离、纯化和检测中得到广泛应用。制备ConA-琼脂糖珠的过程包括以下步骤:

首先,将琼脂糖珠进行活化。通常使用氰溴化物(CNBr)作为活化剂,将琼脂糖珠悬浮在1M NaOH中,并加入冰冷的CNBr溶液,在冰浴中搅拌数分钟以活化琼脂糖珠。然后,将活化的琼脂糖珠用冰冷的1mM HCl迅速洗涤,去除多余的CNBr。

接下来,将ConA溶解在PBS缓冲液中,并加入到活化的琼脂糖珠中,保持反应体系的pH值在8.0左右,在4°C下旋转反应4至16小时,以确保ConA与琼脂糖珠充分偶联。为封闭未反应的活化位点,可以加入适量的乙醇胺或其他封闭剂,并继续反应1至2小时。

*后,使用PBS缓冲液反复洗涤偶联后的琼脂糖珠,去除未结合的ConA和其他反应副产物。将偶联好的ConA琼脂糖珠悬浮在PBS中,添加0.02%的叠氮化钠作为防腐剂,4°C保存。ConA-琼脂糖珠在生物研究中有多种应用,主要包括:糖蛋白纯化,利用ConA特异性结合糖类分子的能力,进行糖蛋白的分离和纯化;细胞表面糖类检测,用于检测细胞表面的糖类结构,进行细胞黏附和识别实验;酶固定化,将糖类修饰的酶固定在琼脂糖珠上,增加酶的稳定性和重复使用性。

通过结合ConA的特异性和琼脂糖珠的稳定性,ConA-琼脂糖珠成为一种多功能的实验工具,在生物化学和分子生物学研究中具有广泛的应用。

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