零基础小白笔记3| 数据处理与质控

❀前言:(书接上回)

零基础小白笔记1 | ChIP-seq原理、操作流程、分析流程

零基础小白笔记2 | 数据与样本信息处理

一、sra数据转换为fastq文件:

(1)安装好fastq-dump:(需提前安装conda环境)

conda install fastq-dump
## 或者使用 pip命令
## pip install fastq-dump 

(2) 使用fastq-dump进行转换:

fastq-dump --split-3 --outdir /path/to/output_directory --gzip SRR5195455.sra

(2.1)fastq-dump 是 NCBI SRA Toolkit 中的命令,可从 NCBI Sequence Read Archive(SRA)下载原始测序数据并将其转换成 fastq 格式。

(2.2)使用方法:

     fastq-dump --split-3 --outdir /path/to/output_directory --gzip your_sra_file.sra

  • --split-3: 将双端测序数据分割成两个独立的 FASTQ 文件,一个包含第一端序列,另一个包含第二端序列。这通常在双端测序中使用,以便分别处理两个端的序列数据。

  • /path/to/output_directory: 指定输出目录,即将生成的 FASTQ 文件存放的位置。

  • --gzip: 对生成的 FASTQ 文件进行 gzip 压缩,减小文件大小。

  • your_sra_file.sra:指定要处理的 SRA 文件的访问号。

  • 输出结果应为:SRR5195455.fq.gzip

二、进行原始数据质控:

(1)安装好fastqc工具:

conda install fastqc
## 或者使用pip命令
pip install fastqc

(2)使用fastqc进行质量控制:

首先进入到存放fq(也就是fastq)文件的目录下

cd ./data/rawdata

使用fastqc命令进行分析:

fastqc -t 30 -o ./data/rawdata/rawdata-qc SRR5195455.fq

(2.1)fastqc是一种用于对FASTQ格式的测序数据进行质量控制的工具,常用参数如下:

  • --o <output_directory>: 指定输出目录,将生成的质量控制结果文件保存在指定的目录中。

  • --t <num_threads>: 指定使用的线程数,以加快质量控制的速度。默认为单线程。

  • --quiet: 静默模式,减少输出信息,适用于批量处理。

  • 输出结果:网页版报告html

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