❀前言:(书接上回)
零基础小白笔记1 | ChIP-seq原理、操作流程、分析流程
一、sra数据转换为fastq文件:
(1)安装好fastq-dump:(需提前安装conda环境)
conda install fastq-dump
## 或者使用 pip命令
## pip install fastq-dump
(2) 使用fastq-dump进行转换:
fastq-dump --split-3 --outdir /path/to/output_directory --gzip SRR5195455.sra
(2.1)fastq-dump 是 NCBI SRA Toolkit 中的命令,可从 NCBI Sequence Read Archive(SRA)下载原始测序数据并将其转换成 fastq 格式。
(2.2)使用方法:
fastq-dump --split-3 --outdir /path/to/output_directory --gzip your_sra_file.sra
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--split-3: 将双端测序数据分割成两个独立的 FASTQ 文件,一个包含第一端序列,另一个包含第二端序列。这通常在双端测序中使用,以便分别处理两个端的序列数据。
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/path/to/output_directory: 指定输出目录,即将生成的 FASTQ 文件存放的位置。
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--gzip: 对生成的 FASTQ 文件进行 gzip 压缩,减小文件大小。
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your_sra_file.sra:指定要处理的 SRA 文件的访问号。
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输出结果应为:SRR5195455.fq.gzip
二、进行原始数据质控:
(1)安装好fastqc工具:
conda install fastqc
## 或者使用pip命令
pip install fastqc
(2)使用fastqc进行质量控制:
首先进入到存放fq(也就是fastq)文件的目录下
cd ./data/rawdata
使用fastqc命令进行分析:
fastqc -t 30 -o ./data/rawdata/rawdata-qc SRR5195455.fq
(2.1)fastqc是一种用于对FASTQ格式的测序数据进行质量控制的工具,常用参数如下:
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--o <output_directory>
: 指定输出目录,将生成的质量控制结果文件保存在指定的目录中。 -
--t <num_threads>
: 指定使用的线程数,以加快质量控制的速度。默认为单线程。 -
--quiet
: 静默模式,减少输出信息,适用于批量处理。 -
输出结果:网页版报告html