细胞增殖曲线_干货 | 细胞表型检测

我们在前面，花了很多篇幅讲述了Loss of Function和Gain of function的各种方法。那么我们将目的基因在细胞中敲除、敲降、过表达之后，怎样研究其功能呢？首先可以进行的，就是细胞表型检测。这一回，我们就来讲述细胞表型检测。

细胞表型是涉及基因和蛋白表达的多个细胞过程的集合体，这些过程导致细胞特定的形态和功能。细胞表型检测，检测的是如下若干表型：周期、增殖、凋亡、迁移、侵袭、克隆形成、自噬、EMT（Epithelial-Mesenchymal Transition，上皮间充质转化）、血管生成。

在细胞内，将某目的基因敲除、敲降、过表达，建立稳转株后，与对照细胞一起，检测细胞表型，观察每项表型的变化，可推断该目的基因的功能。

细胞周期

细胞周期是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程。细胞内的DNA含量随着细胞周期进程发生周期性变化。碘化丙啶（propidine iodide, PI）是一种核酸染料，可透过凋亡中晚期的细胞和死细胞，嵌入核酸DNA或RNA双链螺旋的碱基之间，使细胞核红染，并且荧光强度和所嵌入的核酸含量成正比。细胞周期检测时，首先用RNA 酶将RNA消化排除影响，通过流式细胞术检测PI荧光强度直接反映细胞各时相的DNA分布状态，从而计算出各时相的百分率。