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PBS缓冲液配方

不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。

我们实验室的配方：

A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：

磷酸二氢钾(KH2PO4，MW136.09)1.361g，加双蒸水至100ml。

B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：

酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O，MW177.99)1.78g，加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O，MW358.14)3.58g，加双蒸水至100ml。

pH －－ A液 (ml) －－ B液(ml)

5.60 －－ 9.50 －－ 0.25

5.91 －－ 9.00 －－ 1.00

6.24 －－ 8.00 －－ 2.00

6.47 －－ 7.00 －－ 3.00

6.64 －－ 6.00 －－ 4.00

6.81 －－ 5.00 －－ 5.00

6.98 －－ 4.00 －－ 6.00

7.17 －－ 3.00 －－ 7.00

7.38 －－ 2.00 －－ 8.00

7.73 －－ 1.00 －－ 9.00

8.04 －－ 0.50 －－ 9.50

一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4?2H2O(磷酸二氢钠)Nacl 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可PBS缓冲液 称取NaCl?8g，KCl?0.2g，Na2HPO4?12H2O?3.63g,?KH2PO4?0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。

磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)

试剂： NaH2PO4·2H2O ? ? Na2HPO4·12H2O

配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB)，根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

(1)0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(2)0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4～7.5)。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7～8.0)

pH ? 0.2mol/L NaH2PO4(ml) ? 0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7 ? ? ? ? ? 93.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 6.5

5.8 ? ? ? ? ? 92.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 8.0

5.9 ? ? ? ? ? 90.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 10.0

6.0 ? ? ? ? ? 87.7 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 12.3

6.1 ? ? ? ? ? 85.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 15.0

6.2 ? ? ? ? ? 81.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 18.5

6.3 ? ? ? ? ? 77.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 22.5

6.4 ? ? ? ? ? 73.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 26.5

6.5 ? ? ? ? ? 68.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 31.5

6.6 ? ? ? ? ? 62.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 37.5

6.7 ? ? ? ? ? 56.5 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 43.5

6.8 ? ? ? ? ? 51.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 49.0

6.9 ? ? ? ? ? 45.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 55.0

7.0 ? ? ? ? ? 39.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 61.0

7.1 ? ? ? ? ? 33.0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 67.0

7.2 ? ? ? ? ? 28.0 ? ?