双光子荧光成像_双光子显微成像技术研发取得进展

近日，中国科学院深圳先进技术研究院研究员郑炜团队在高分辨双光子显微成像技术研发中取得系列进展。

第一项研究工作与华中科技大学教授费鹏团队合作完成，开发出基于多帧重构提高双光子成像轴向分辨率的方法。与传统双光子成像相比，该方法对成像轴向分辨率和信噪比均提升超过3倍。相关研究成果以Axial resolution improvement of two-photon microscopy by multi-frame reconstruction and adaptive optics为题，发表在Biomedical Optics Express上，深圳先进院博士叶世蔚为论文第一作者。双光子显微技术以其深层穿透和天然层析能力在生物成像中发挥重要作用，尤其是在大脑神经环路成像中。然而，传统双光子成像技术的轴向分辨率一般是几个微米甚至更差，大于亚微米尺度的横向分辨率，不利于分辨三维分布的一些精细结构，如神经环路上沿轴向分布的轴突、树突和突触等结构。

该研究中，研究人员将多帧重构算法用于双光子成像，结合自主研发的自适应光学模块和相位补偿方法，实现双光子成像轴向分辨率3倍提升，信噪比提升超过3倍。利用该系统，研究人员对小鼠离体脑片和活体大脑进行成像研究，观测到一般双光子成像无法分辨的轴向细节，包括胞体的精细连接、更加清晰的轴突边界和小胶质突起等；实时追踪败血症小鼠模型，清晰观察到小胶质细胞的三维形态变化。该研究提供了一种三维高分辨成像技术，有利于进一步了解脑机理和诊治重大脑疾病。

第二项研究工作是开发出新型自适应光学方法，用于提高双光子成像质量。该方法使1 mm左右的深层脑组织成像