3蛋白wb_如何用ImageJ进行WB定量？

如何用ImageJ进行WB定量？

WB是研究蛋白表达的一个经典方法。对于一些时间点或者是不同组织蛋白表达量的分析，就涉及到量的变化。一些凝胶成像软件带有此分析工具，比如Bio-Rad， Kodak， Li-cor等公司的成像系统。除了这些软件，还有一个比较简单的图像处理软件ImageJ可以很方便的进行灰度分析。ImageJ主页是http://rsb.info.nih.gov/ij/index.html，更多资料可以访问。这里只是简单介绍一种灰度分析的方法。
很容易就能从主页下载并安装ImageJ，从下面简单的几步操作就能完成WB定量分析。 1. 打开文件；2. 把图片转化成灰度图片：Image>Type 选16-bit；

3. 消除背景影响：Process>Subtract Background. 选择50基本可以。

4. 设置定量参数： Analyze>Set Measurements, 点击面积，平均密度，和灰度值及Integrated Density；5. 设置单位 Analyze>Set Scale,在“Unit of length” 边的方框里输入 "pixels"；6. 把图片转换成亮带，Edit>Invert ；

7. 选择Freehand Selection；尽量把条带圈起来； 点击键盘m，出来IntDen灰度值；

10. 用“Freehand Selection”选择下一条带，按m进行测量。

11. 当测定完所有条带，选结果中的“Edit ”的“Select All”，然后复制数据“IntDen”到Excel表即可进行分析。

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