指纹仪数据是存在哪里_科研必备“武器”之DNA测序仪

仪器介绍

DNA测序仪是用于分析特定DNA片段的碱基序列(即腺嘌呤A、胸腺嘧啶T、胞嘧啶C与鸟嘌呤G的排列方式)的实验室仪器，确定重组DNA的方向与结构，对突变进行定位、鉴定和比较研究。可进行DNA测序、杂合子分析、单链构象多态性分析 (SSCP)、微卫星序列分析、单核苷酸多态性(SNP)分析、基因突变检测、HLA配型、法医学上的亲子和个体鉴定、微生物与病毒的分型与鉴定等。

仪器结构

主要包括自动进样器区、凝胶块区和检测区等结构功能区。

自动进样器区功能

自动进样器受程序控制进行三维移动；电极可达到快速分离不同长度DNA片段的目的；样品盘可一次性连续测试 48或96个样本；电极固定螺母起固定电极及毛细管的作用。

凝胶块区功能

注射器驱动杆给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中；样品盘按钮控制自动进样器进出；注射器固定平台起固定注射器的作用；玻璃注射器储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力。

检测区功能

仪器内部发出的激光可通过激光检测器窗口照到毛细管检测窗口上，窗盖起固定毛细管的作用，同时可防止激光外泄；加热板在电泳过程中起加热毛细管的作用；毛细管为填充有凝胶高分子聚合物的玻璃管，电泳时样品在毛细管内从负极向正极泳动。

微型计算机功能

控制主机的运行,并对来自主机的数据进行收集和分析。设置测序条件(样品的进样量、电泳的温度、时间、电压等)，同步监测电泳情况并进行数据分析。

各类软件功能

承担数据收集、DNA序列分析及DNA片段大小和定量分析等功能。

工作原理

采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用四色荧光染料标记的DDNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。由于分子大小不同，在毛细管电泳中的迁移率也不同，当其通过毛细管读数窗口段时，激光检测器窗口中的CCD摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测，激发的荧光经光栅分光，以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光，并在CCD摄影机上同步成像，分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列，从而达到DNA测序的目的。分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。

仪器特点

① 自动化程度高，提供连续、无需监控的操作，自动灌胶、上样、电泳分离、检测及数据分析，可连续运行24小时无需人工干预。

② 样品分析量大，一束毛细管可同时对16个样品进行全自动分析，一天可完成数百个样品的测序或片段分析工作。

③ 先进的荧光检测系统，采用光栅分光，CCD摄像机成像技术，实现多色荧光同时检测。

技术发展

第一代

测序技术用的是链终止法或是化学法(链降解)。

第二代

测序技术最显著的特征是高通量，一次能对几十万到几百万条DNA分子进行序列测序，使对一个物种的转录组测序或基因组深度测序变得方便易行。

第三代

测序技术为纳米孔单分子测序技术。与前两代相比，他们最大的特点就是单分子测序，测序过程无需进行PCR扩增。

应用领域

目前，DNA测序已成为生物学和其他科学领域(如医学，法医学或人类学等)的关键技术。

分子生物学

在分子生物学中，DNA测序可被用于研究基因组及其编码的蛋白质。

进化生物学

由于DNA是携带有遗传信息的大分子，在进化生物学中，DNA测序被用于研究不同生物体之间的相关性以及它们是如何进化的。

宏基因组学(或元基因组学)

作为一门直接取得环境中所有遗传物质的研究，DNA测序使研究人员能够确定微生物群中可能存在哪些类型的微生物。

医学

医疗人员可通过对患者基因(基因组)的测序结果确定该患者是否有携带遗传性疾病的风险。

法医学

DNA测序可以与DNA图谱鉴定(基因指纹分析)一起用于法医鉴定和亲子鉴定。

相关品牌

DNA测序仪的品牌主要为赛默飞(ThermoFisher)、宜曼达(illumina)、珀金埃尔默(PerkinElmer)、富鲁达(FLUIDIGM)，这个品牌拥有不同类型的DNA测序仪，可以满足科研的需求。

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