今天,我们来介绍一下qPCR的数据处理。
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qPCR是什么操作
qPCR这项技术,被广泛用于生物学的研究,只有有以下用途:
- DNA 定量
- RNA 定量
- Genotyping (设计特性型基因探针,通过荧光判断基因型)
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qPCR作为一种DNA定量手段,一般情况下, 还可以分为绝对定量和相对定量。
- 绝对定量 是通过利用已知浓度的DNA样本绘制标准曲线,然后得到未知样的DNA含量
- 相对定量 是通过与管家基因的比较得到相对的基因表达值
好的, 那么一般情况下, 我见过比较多的qPCR,都是以RNA相对定量为目的的,也是本文讨论的焦点。
qPCR怎么个q法
qPCR和PCR一看名字就知道很像,q
就是quantitative的意思,quantitative就是定量的意思。。。(为我的废话鼓掌)
那么, 怎么通过qPCR定量呢?
其实,说到底,qPCR就是通过荧光染料或者荧光探针来表征PCR产物的量,进而推断出PCR前,样本的初始核酸量。
具体原理是,对于不同的样本和基因,比较到达一定荧光强