1流式细胞术荧光比值计算_流式细胞术—荧光染料对应流式检测通道

在操作流式细胞术检测的过程中，经常会遇到同学这样要求：荧光素在我们的仪器上用FL4通道接收，你也必须用FL4通道接收” 或者“老师我按照文献进行了多色实验的搭配，你为什么不用文献中的通道给我检测？”。每当遇到这种情况的时候，常常感觉…… 。

相同的荧光素在不同的仪器上是否用相同的接收通道？

下图解释了相同的荧光素在不同仪器上的接收通道的问题。如APC在CytoFLEX以及FACSAriaII上用FL6接收，但FACSCalibur 用FL4通道接收，在Moflo XDP上用FL9通道接收。因此，不同的仪器具有不同的设置，接收荧光素的通道可能存在不同。

为了确定荧光素的接收通道，我们应该掌握仪器光学系统及荧光素的相关信息

(一)流式细胞仪器的光学系统（激光光源与光学系统）

（1）激光光源：激光光源的光束在达到流动室前，先经过透镜，将其聚焦，形成几何尺寸约为22×66μm 即短轴稍大于细胞直径的光斑[1]。椭圆形光斑激光能量属正态分布，为保证样品中细胞受到的光照强度一致，须将样本流与激光束正交且相交于激光能量分布峰值处[1]。现有流式细胞仪配备的激光器种类主要为488nm、638nm、561nm和405nm，也有355nm或者375nm、532nm和808nm等。有的流式细胞仪只配备488