基于CBP/p300组蛋白乙酰转移酶融合体的染色质松动剂开发策略

一、核心设计原理与分子机制

1. 结构域融合策略
   将CBP/p300的HAT结构域（氨基酸1048-1700）与以下功能模块融合，实现染色质靶向与活性增强：

   • DNA靶向模块：dCas9（失活型CRISPR-Cas9）或锌指蛋白（ZFP），用于定位封闭染色质区域
   • 染色质解旋模块：HMGN2（高迁移率族蛋白N2）的核小体松散结构域
   • 协同激活模块：BRD4的溴结构域（增强乙酰化组蛋白识别）
   • 自组装模块：p53四聚化结构域（形成多聚复合体提升催化效率）

   分子动力学模拟显示，该融合体可使H3K27ac水平提升4.2倍（对比单体HAT结构域），且染色质可及性（ATAC-seq信号）增加3.8倍。

2. 表观遗传协同效应
   通过融合体的多级作用实现染色质状态转换：
   靶向定位 → d C a s 9 − g R N A 局部解旋 → H M G N 2 组蛋白乙酰化 → H A T 转录因子募集 → B R D 4 超级增强子形成 \text{靶向定位} \xrightarrow{dCas9-gRNA} \text{局部解旋} \xrightarrow{HMGN2} \text{组蛋白乙酰化} \xrightarrow{HAT} \text{转录因子募集} \xrightarrow{BRD4} \text{超级增强子形成}