DDE-生物素-四聚乙二醇-羧基，Dde Biotin-PEG4-COOH

DDE-生物素-四聚乙二醇-羧基是一种多功能化学试剂，常用于生物偶联和标记实验。以下是关于该化合物的详细信息和应用方法：

化学结构

DDE-生物素-四聚乙二醇-羧基的化学结构包含以下部分：

• DDE：一种光敏保护基团，可通过光照去除。
• 生物素：一种小分子，能够与链霉亲和素或亲和素特异性结合。
• 四聚乙二醇：一种亲水性聚合物，增加化合物的水溶性和稳定性。
• 羧基：一种反应性基团，可用于与其他分子进行偶联。

结构式：

应用方法

DDE-生物素-四聚乙二醇-羧基在生物化学和分子生物学中有多种应用，以下是其主要用途和操作步骤：

蛋白质标记

将DDE-生物素-四聚乙二醇-羧基与蛋白质的氨基基团偶联，实现蛋白质的生物素化。具体操作如下：

1. 将蛋白质溶解在适当的缓冲液中（如PBS，pH 7.4）。
2. 加入DDE-生物素-四聚乙二醇-羧基，通常使用摩尔比为1:10（蛋白质：试剂）。
3. 在室温下反应1-2小时。
4. 通过透析或凝胶过滤去除未反应的试剂。

光控释放

利用DDE基团的光敏特性，可以通过光照实现生物素的释放。具体操作如下：

1. 将标记好的蛋白质或分子暴露在紫外光（365 nm）下。
2. 光照时间通常为5-10分钟。
3. 通过凝胶电泳或质谱验证生物素的释放。

亲和纯化

利用生物素与链霉亲和素的高亲和力，进行目标分子的纯化。具体操作如下：

1. 将标记好的样品与链霉亲和素树脂混合。
2. 在4°C下孵育1小时。
3. 通过离心或过滤收集树脂。
4. 用适当的缓冲液洗涤树脂，去除未结合的分子。
5. 使用生物素或酸性缓冲液洗脱目标分子。

同系列：

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