Biotin/生物素-蛋白交联剂/CHO aldehyde醛基乙醛-蛋白交联剂/OPSS邻吡啶二硫巯基吡啶-蛋白交联剂-CSDN博客

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Biotin/生物素-蛋白交联剂/CHO aldehyde醛基乙醛-蛋白交联剂/OPSS邻吡啶二硫巯基吡啶-蛋白交联剂

交联是指将两个或多个分子通过共价键化学结合的过程。交联剂包含具有反应活性的末端，可与位于蛋白或其他分子上的特定功能基团，如伯胺和巯基反应。蛋白和多肽上有多个化学基团可用于交联，因此蛋白和多肽可以作为偶联的靶标，用于使用交联方法的研究中。

交联剂用于确定邻近蛋白间的关系以及配体-受体相互作用。具有氨基反应活性的同型双功能的交联剂：琥珀酰亚氨酯或亚氨酸酯、以及具有氨基反应活性和光活化叠氮苯化合物的异型双功能交联剂是这些应用中较常用的交联剂。

交联剂也常用于修饰核酸、药物和固相载体表面。用于氨基酸和核酸表面修饰和标记的化学原理是相同的。该化学领域称为生物偶联，包括交联、固定、表面修饰和生物分子标记。

氨基-氨基交联剂

基NHS-酯和亚氨酸酯反应性基团的同型双功能氨基反应性蛋白交联剂，适用于与伯胺的选择性连接；具有短臂或长臂、可解离或不可逆、膜通透型或细胞表面型等多种间隔臂类型可供选择。

巯基-糖类交联剂

基于马来酰亚胺和酰肼反应基团的交联剂适用于连接巯基和糖类，并形成共价交联

巯基-巯基交联剂

基于马来酰亚胺或吡啶二巯基反应基团的同型型双功能交联剂，适用于与蛋白或多肽的硫醇（还原型半胱氨酸）进行特异性共价连接，以形成稳定的硫醚键。

光反应性交联剂

芳香叠氮、双丫丙啶和其他光反应（光活化）的异型双功能交联剂，能够通过两步活化连接与受体-配体相互作用复合体相关的蛋白、核酸和其他分子。

氨基-巯基交联剂

异型双功能蛋白交联剂适用于蛋白和其他分子的伯胺（赖氨酸）和巯基（半胱氨酸）基团之间的连接；间隔臂具有不同长度和类型可供选择。

化学选择性连接交联剂

化学选择性连接是指使用相互特异的偶联试剂对进行连接。这些试剂通常用于体内代谢性标记。

体内交联

查看不同类型的用于靶向细胞表面或胞内蛋白并适合不同下游分析方法的体内交联剂。

羧基-氨基交联剂

适用于羧基（谷氨酸、天冬氨酸、C 端）与伯胺（赖氨酸、N 端）连接的碳二亚胺交联剂 DCC 和 EDC (EDAC)；适用于胺连接中稳定活化羧酸的 N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)。

常见：

DSS（双琥珀酰亚胺辛二酸酯）

描述：

Thermo Scientific Pierce DSS（也称为双琥珀酰亚胺辛二酸酯）是不可裂解的膜可穿透性交联剂，在 8 个碳原子间隔臂的每个末端有一个胺反应性 N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯。

NHS 酯在 pH 7-9 条件下与伯胺反应可形成稳定的酰胺键，同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺离去基团。蛋白（包括抗体）通常在赖氨酸 (K) 残基的侧链和每个多肽的 N 端有若干伯胺，这些伯胺可用作 NHS 酯交联试剂的靶标。DSS 先溶解在有机溶剂（如 DMF 或 DMSO）中，然后添加到水性交联反应中。DSS 的水溶性类似物 BS3 也适用于需要亲水性交联剂（例如为了产生细胞表面交联）的应用。DSS 和 BS3 对于伯胺的交联活性基本相同。

二琥珀酰亚胺的特点：

•反应性基团：NHS 酯（两端）

• 可与以下基团发生反应：氨基基团（伯胺）

• 胺反应性磺基-NHS 酯与任何含伯胺分子迅速反应

• 膜可穿透性，可进行细胞内交联

• 高纯度结晶试剂可用于生成高纯度偶联物

• 不可裂解

• 水不溶性（先溶于 DMF 或 DMSO 中）；与 BS3（磺基-DSS）比较

应用：

• 细胞裂解和免疫沉淀前细胞内蛋白的化学交联

• “固定”蛋白相互作用，以便识别较弱或瞬时的蛋白相互作用

• 蛋白交联通过单步反应生成生物偶联物

• 将蛋白固定到胺包被的表面上

Sulfo-SMCC (sulfosuccinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate)

描述：

Thermo Scientific Pierce Sulfo-SMCC是水溶性的氨基-巯基交联剂，在中等长度的环己烷间隔臂（8.3埃）两端分别包含了NHS酯和马来酰亚氨基反应基团。

Sulfo-SMCC的特性：

• 反应基团: sulfo-NHS酯和马来酰亚胺

• 反应性:在氨基与巯基之间发生

• （相比SMCC）具有水溶性，可以在生理溶液中实现交联

• 高纯度晶体试剂可用于生成高纯度马来酰亚胺激活衍生物

• 环己烷桥为马来酰亚胺基团赋予了额外的稳定性，这使得Sulfo-SMCC成为马来酰亚胺激活蛋白的理想交联试剂。4°C、pH7的条件下，马来酰亚胺基团在0.1 M磷酸钠缓冲液中可稳定保存64小时。

磺基琥珀酰亚胺基-4-（N-马来酰亚胺甲基）环己烷-1-羧酸酯(Sulfo-SMCC）是不能切割，不具膜通透性的交联剂，包含一个胺反应性的-羟基琥珀酰亚胺（NHS酯）和一个巯基反应性马来酰亚胺基团。NHS酯能够在pH7-9的条件下与伯胺基发生反应，形成稳定的酰胺键。马来酰亚胺能够在pH6.5-7.5的条件下与巯基发生反应，形成稳定的硫醚键。由于间隔臂中含有环己烷桥，Sulfo-SMCC和SMCC的马来酰亚胺基团甚至在pH7.5条件下都具有极好的稳定性。由于含有疏水的磺酰基团，Sulfo-SMCC在水及许多常规缓冲液中的溶解度能达到10mg/mL左右，这就避免了有机溶剂可能对蛋白结构造成的损害。

应用：

• 抗体的酶标记 - 同时保留酶与抗体的特异性

• 通过一步或两步交联反应生成特异生物偶联物

• 生成巯基反应性、马来酰亚胺激活的载体蛋白，用于结合半抗原

规格：

Sulfo-SMCC按照较高生产规格制造，能够生成较特异的生物偶联物和马来酰亚胺激活蛋白，进而确保数据的完整性，并为您提供较高水平的交联一致性。每一批次的Sulfo-SMCC均经过测试，符合以下较低标准。

• 均一度：IR扫描只显示Sulfo-SMCC交联剂结构和功能性基团的峰值属性

• 纯度：定量NMR检测纯度≥ 90%（交联剂纯度的较高标准）

• 可溶性：去离子水中含量≥ 10 mg/mL

DSP（二硫双(琥珀酰亚胺丙酸酯)）、Lomant 试剂

描述：

Thermo Scientific Pierce DSP（Lomant 试剂）是水不溶性、同型双功能 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS 酯）交联剂，具有硫醇可裂解性、伯胺反应性，适用于多种应用。DSP 在 8 个碳原子间隔臂的每个末端有一个胺反应性 NHS 酯。NHS 酯在 pH 7–9 条件下与伯胺反应可形成稳定的酰胺键，并释放 N-羟基琥珀酰亚胺。蛋白（包括抗体）通常在赖氨酸 (K) 残基的侧链和每个多肽的 N 端有若干伯胺，这些伯胺可用作 NHS 酯交联试剂的靶标。DSP 是非磺化的且不溶解在水中，因此必须先溶解在有机溶剂中，然后再添加到水反应混合物中。由于 DSP 不具有带电的基团，它具有亲脂性和膜可穿透性，因此可用于细胞内和膜内偶联。DSP (DTTSP) 的磺化类似物具有水溶性。如果相关的应用需要一个在还原剂条件下不能裂解的稳定间隔臂，也可使用 DSP 交联剂的不可裂解类似物 DSS。

Thermo Scientific No-Weigh 是以预分装规格提供的专业试剂。预称重的包装可消除重复开瓶和关盖，从而防止随时间推移导致的试剂的污染和反应性的降低。对于这种规格，可每次使用一小瓶新鲜试剂，消除了对少量试剂进行称重的麻烦，并减少了对试剂稳定性的担忧。

DSP 在 8 个碳原子间隔臂的每个末端有一个胺反应性 N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯。NHS 酯在 pH 7-9 条件下与伯胺反应可形成稳定的酰胺键，同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺离去基团。蛋白（包括抗体）通常在赖氨酸 (K) 残基的侧链和每个多肽的 N 端有若干伯胺，这些伯胺可用作 NHS 酯交联试剂的靶标。如果相关的应用需要一个在还原剂条件下不能裂解的稳定间隔臂，也可使用 DSP 交联剂的不可裂解类似物 DSS。

Lomant 试剂的特点：

•反应性基团：NHS 酯（两端）

• 可与以下基团发生反应：氨基基团（伯胺）

• 胺反应性磺基-NHS 酯与任何含伯胺分子迅速反应

• pH 值 8.5 时，间隔臂中的二硫键易被 10-50 mM DTT 或 TCEP 裂解

• 间隔臂也可被还原 SDS-PAGE 上样缓冲液裂解

• 可裂解交联剂能够分离交联产物

• 水不溶性（先溶于 DMF 或 DMSO）；与 DTSSP (Sulfo-DSP) 具有可比性

• 具有膜可穿透性，可用于细胞内交联

应用：

• 细胞裂解和免疫沉淀前细胞内蛋白的化学交联

• “固定”蛋白相互作用，以便识别较弱或瞬时蛋白相互作用