hi~大家好！我是三三，又到了和大家漫谈科研的时候了！
2020年12月8日，星期二，科研路上我们即将又度过一个春秋！
进入2020年的最后一个月，总结\计划\恍惚也许接踵而来！
但是，既然走上了科研这条路，那么请君且行且加油，努力充实自己吧！
话不多说，开始我们今天的正题。
还记吗？曾经的曾经，我们为了记住那些该死的培养基种类，我们天天重复着“厌、养、选、基、鉴”？
但是直到现在培养基的发展可谓是迅猛了，各种不同类型的培养基层出不群，再也不是几句顺口溜可以解决的了！
本着知其然，也要知其所以然的精神，
今天三三来带大家一起来着重回顾一下培养基的发展史，
漫谈下培养基的最新发展现状！
首先，我们先来回顾下培养基的源起！
话说，说到培养基的起源，
按照我们科研圈“按资排辈第一人”的老传统，必须要提到这么两位大佬：巴斯德、科赫
当然，作为生命科学“新大陆”培养基的发明，这一段历程是曲折而费时的，如果用一句话来总结的话，大概就是：巴斯德领衔主演，科赫助力的纯种分离技术，在无菌操作的基础上历时大半个世纪，终于宣告“培养基”的诞生！
回顾短短只有半个世纪左右的培养基历史，细胞的体外分离培养可谓是为生命科学等学科开启了新的天地，当然，伴随着培养基带来的热潮，培养基的探索得到了巨大且迅速的发展：
做了下统计，就三三所了接触到的，就哺乳动物细胞培养基而言，大概有15大类，37小类的培养基。当然，随着生科发展研究方向越来越宽泛，培养的种类估计都是以千计的。
| 培养基名称 | 描述 | ||
|---|---|---|---|
| Minimum EssentialMedium（MEM） | 也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。 | ||
| RPMI-1640 Medium | RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。 | ||
| DMEM-高糖 | 一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。 | ||
| DMEM-低糖 | 一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。 | ||
| DMEM/F12 | DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。 | ||
| McCoy’s 5A | McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。 | ||
| IMDM | Guilber 和Iscove将Dulbecco’Medium 改良为 Iscove’s Medium，用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞，LPS刺激的B细胞，骨髓造血细胞，T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液，因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。 | ||
| M-199 Medium | 1950年，Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液，即M-199，主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞，并能培养转染的细胞。 | ||
| Leibovitz Medium （L-15） | L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养，用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系，氨基酸组成进一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。 | ||
| Ham’s F-12 | 可以在加入很少血清的情况下应用，特别适合单细胞培养和克隆化培养，是无血清培养中常用的基础培养液。 | ||
| Ham’s F-10培养基 | 适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。 | ||
| William’s Medium E | 用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。 | ||
| MCDB 131 培养液 | 用于培养内皮细胞。 | ||
| 植物血凝素（PHA） | 增加细胞转化和DNA合成。 | ||
当然，说到这里，不得不提的必然是“无血清”培养基。作为崛起于上90年代的新秀，此“木”秀于林而有了燎原之势。凭借着既能满足细胞在体外长 时间培养的要求，又能避免动物血清所带来的不利的优势，迅速大火大红。
当然，作为作为妥妥的生科“网红”培养基，它的发展史必须是要介绍一下的。
无血清培养基的发展历程一般分为无血清培养基、无动物源培养基、无蛋白培养基及化学成分限定培养基等四类。
| 种类 | 描述 |
|---|---|
| 无血清培养基 | 无血清培养基是在合成培养基的基础上发展起 来的，与传统的培养基相比，既能满足细胞在体外长 时间培养的要求，又能避免动物血清所带来的不利 因素。无血清培养基的发展历程一般分为无血清培 养基、无动物源培养其、无蛋白培养基及化学成分限 定培养基等四类 |
| 无动物源培养基 | 此类培养基采用蛋白水解物、重组蛋白或其他 化学物质来取代动物源蛋白。它既可以满足细胞生 长及增殖的需要，还能够降低培养基的生产成本，提 高重组蛋白类药物安全性。目前主要应用于生物 药品的研发和生产中。 |
| 无蛋白培养基 | 该 类 培 养 基 完 全 不 含 有 血 清 和 动 物 来 源 的 蛋 白，但仍包含来源于植物蛋白的水解物或合成多肽 片段等其他衍生物。由于所含蛋白极低，并且蛋白 成分明确，有 利 于 重 组 蛋 白 的 下 游 生 产、分 离 和 纯 化，总体成本也会大幅 下 降。但 其 通 用 性 较 差， 需要针对目标细胞株进行特异性的优化。目前主要应 用 于 生 命 科 学 研 究 和 基 因 工 程 药 物 开 发 等 领域。 |
| 化学成分限定培养基 | 此类培养 基 完 全 无 血 清、无 蛋 白，成 分 完 全 明 确，可以保证培养基批次间的一致性。它既有利于 跟踪细胞培养的代谢情况，在后续的分离纯化中也 非常方便，是目前最为安全和理想的培养基。可是 并非所有的细胞都能在化学限定培养基中达到较高 的表达水平，需要不断改进设计方案和配方 |
当做当之无愧的2.0代培养基---无血清培养基的潜力必然是巨大的，所以，在无血清培养基的具体应用中，可以通过选择 或优化适当的基础培养基和补充因子的种类及用量，使其更符合培养要求。例如，细胞工程的常用细 胞 ＣＨＯ 往 往 是 利 用 ＤＭＥＭ ∶Ｆ１２∶ＲＰＭＩ１６４０ （２∶１∶１）或者 ＥＸ－ＣＥＬＬＴＭ３０２作为基础培 养 基，而 Ｖｅｒｏ 的 常 用 基 础 培 养 基 则 为 Ｍ１９９、 ＤＭＥＭ 或Ｆ１２等。
除此之外，无血清培养基培养细胞过程可以借助培养过程优化、统计学优化、高通量设计等方式学进行优化设计，使无血清培养基的应用更具有针对性、优越性。
| 应用方向 | 成熟应用 |
|---|---|
| 生物制品和生物药物研制与生产方面 | 活性蛋白、疫苗、单克隆 抗 体 和 基因治疗药物生产 |
| 干细胞培养和研究方面 | 间充质干细胞、人脐血造血干细胞、从人胚胎干细胞、肠道组织天然干细胞 |
| 肿瘤研究方面 | 乳腺癌、结肠癌、神经母细胞瘤、前列腺癌、dc细胞免疫疗法、ＤＣ肿瘤疫苗 |
目前，无血清培养基在理论研究和实践应用方面均已取得诸多切实有效的成果，为科学研究和国 民生产做出了卓有成效的贡献。但是，由于体外培 养的细胞类型具有明显的多样性，而现有无血清培养基往往适用范围较为狭窄，因此亟待需要研发出普适性强的无血清培养基配方，提高培养通用性，以 能同时满足不同细胞的要求。
另外，虽然无血清培养基较有血清培养基节约了血清的成本，可是有些 无血清培养基的补充因子的价格仍较为昂贵，应进 一步研发相对廉价而有效的替代品，降低总体成本。 相信随着代谢组学、基因组学和蛋白质组学技术的 不断完善，资源共享的无血清培养基在线数据库的 建立，以及更 多 科 学 设 计 方 法 的 运 用，无 血 清 培 养基的开发和优化必将会得到更快的发展。特别是 生产高效性、培养通用性、安全风险和降低成本等方 面应成为今后无血清培养基深入改进的重点方向， 从而使其能在生物医药行业和生命科学基础研究等 领域得到更为广泛而安全的应用。
最后，三三在还归纳了细胞培养近期最新发展动态，以供大家参考：
1.Cell Systems：计算机技术帮助优化细胞培养条件
在最近一项研究中，新加坡杜克大学-国大医学院和澳大利亚莫纳什大学的研究人员设计出一种算法，该算法可以预测在实验室培养中保持细胞健康所需的分子。他们开发了一种称为EpiMogrify的计算方法，该方法可以预测发信号通知干细胞转变为特定组织细胞的分子，从而有助于加快需要在实验室中增加患者细胞数量的治疗。
2.诱导胚胎干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的培养方法
3.人子宫平滑肌瘤原代细胞培养方法的建立和优化
4.银杏内酯B调控SENP2基因对体外培养心衰模型心肌细胞的保护作用
5.复方七芍降压片对TNF-ɑ诱导的与平滑肌细胞共培养的血管内皮细胞中炎症因子与AP-1、MCP-1蛋白表达的影响
6.培养液充气时间对小鼠4细胞胚胎密闭培养效果的影响
7.生物反应器不同搅拌速度的计算流体力学模拟及对悬浮培养CHO细胞的影响
8.不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响
9.不同通气方式对抗破伤风毒素抗体工程细胞株生长及蛋白表达的影响
10.精原干细胞体外三维培养法的研究进展
11.槲皮素对体外培养奶牛小肠上皮细胞生长的影响
12.人脐带血间充质干细胞混合培养体系的建立
13.兔原始生殖细胞体外培养的研究
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