CRISPR抑制（CRISPRi）技术使用丧失酶切活性的Cas9（deadCas9，dCas9），dCas9能到达向导RNA指定的位点，但无力对DNA进行剪切（Cell, 152:1173-83, 2013）。当dCas9结合到基因组的时候，会阻断转录机器的结合，能抑制靶基因的转录，而不论靶基因是编码还是非编码的DNA片段。CRISPRi的可逆性是其一大特色。另一项成熟的基因抑制实验：RNA干扰（RNAi）技术的作用靶点是RNA，而CRISPRi阻止转录的起始，对基因的沉默更彻底。此外RNAi的脱靶效应一直令人担忧。虽然CRISPR系统也存在脱靶效应，但要比RNAi少得多，因为CRISPRi必须在转录起始位点附近才能发挥作用。以下的dCas9稳转细胞系可用于CRISPRi实验，仅需转染向导RNA即可实现CRISPRi。
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经典的CRISPR/Cas9基因编辑系统，通过突变Cas9核酸内切酶的HNH结构域和RuvC结构域，在保留Cas9蛋白结合dna靶序列的基础上，消除DNA剪切能力，构建了dCas蛋白（deadCas9，dCas9）。当dCas蛋白结合DNA后，抑制转录激活因子结合靶序列，形成基因暂时沉默，当dCas9蛋白被细胞自然清除后，转录又可以恢复。
相比另一种基因表达调控工具RNA干扰（RNAi），CRISPRi基因沉默作用可逆，并且从转录起始抑制，基因沉默更彻底，由于必须在转录起始位点附近才能发挥作用，CRISPRi脱靶效应更低。
北京泽平代理的dCas9蛋白稳转细胞系（dCas9稳转细胞株），将dCas9蛋白基因转染入各类常用细胞系，通过筛选单克隆，可以得到稳定表达dCas9蛋白的细胞系。实验时，仅需转染gRNA/sgRNA，进而高效实现基因沉默，令CRISPRi操作大大简化，而无需面对核糖核蛋白复合体RNP大分子转染效率低的问题。
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