ips细胞培养技术、实验材料应用报告

 

相关技术报道：

iPS细胞培养新方法 可减少移植引发感染症风险

2014年01月13日报道，日本京都大学日前发表一份公报称，其研究小组开发出一种新方法，可以简单地培养诱导多功能干细胞（iPS细胞），同时减少移植过程中引发感染症的风险。

日本京都大学日前发表一份公报称，其研究小组开发出一种新方法，可以简单地培养诱导多功能干细胞（iPS细胞），同时减少移植过程中引发感染症的风险。

迄今为止，在培养iPS细胞时，需要使用含有实验鼠饲养细胞和牛血清的培养液补充营养。但是，在利用这种iPS细胞培养出的组织和细胞时，来自动物的感染症有可能感染人体，且测试其安全性也耗时很长。

京都大学iPS细胞研究所的山中伸弥和中川诚人等研究人员注意到，一种叫做“Laminin－511”的蛋白质能把细胞粘结在一起，于是利用这种蛋白质的片段“Laminin－511E8”（LN511E8）制作出培养基，发现iPS细胞能够在培养皿上牢固“扎根”。为取代动物成分，研究小组还制作出添加了氨基酸和维生素的培养液，这样能增加安全性更高的iPS细胞的数目。

由于此次开发出的方法不使用动物成分，可以减少确认安全性的实验程序，简单高效，有望使iPS细胞早日在再生医疗领域实现临床应用。

研究小组还发现，利用新方法制作的人类iPS细胞，能够发育为可产生神经传导物质多巴胺的神经细胞、能制造胰岛素的细胞以及血液细胞等，有望用于治疗帕金森氏症和糖尿病等疾病。

研究小组还利用这种新方法成功培育了与iPS细胞拥有同样能力的胚胎干细胞（ES细胞）。这一成果的论文已刊登在新一期英国《科学报告》杂志上。

 

Nature子刊：如何更好地培养iPS细胞

2014年06月26日，目前人类诱导多能干细胞（hiPSC）的培养条件虽然有助于维持细胞的多能性，但也可能引入污染物，大大限制了这些细胞在临床上的应用。为此，日本RIKEN的研究团队找到了一个更好的hiPSC培养方案。他们发现，一种参与免疫应答的趋化因子CCL2能够替代干细胞培养中的传统生长因子，增强干细胞的多能性。

干细胞能够分化成为机体内的任何细胞类型。日本科学家山中伸弥（Shinya Yamanaka）开发的诱导多能干细胞技术，可以将成熟细胞重编程为多能细胞，使其回到类似干细胞的状态，重新获得强大的分化能力。这一技术在再生医学领域有着广阔的应用前景，被视为细胞替代疗法的新希望。

然而，目前人类诱导多能干细胞（hiPSC）的培养条件虽然有助于维持细胞的多能性，但也可能引入污染物，大大限制了这些细胞在临床上的应用。

 

为此，日本RIKEN的研究团队找到了一个更好的hiPSC培养方案。他们发现，一种参与免疫应答的趋化因子CCL2能够替代干细胞培养中的传统生长因子，增强干细胞的多能性。这一成果发表在Nature旗下的Scientific Reports杂志上。

培养hiPSC的标准方法需要用bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）来维持其多能状态。在这样的培养条件下，hiPSC其实更接近于外胚层干细胞（epiblast stem cell），而不是真正的胚胎干细胞。

研究人员将培养基中的bFGF换成CCL2进行研究。他们发现，CCL2也能够激活JAK/STAT通路，该通路与免疫应答和多能干细胞的维持有关。研究显示，用CCL2进行培养会增强多能性标志基因的表达。

为了全面理解CCL2的作用机制，研究人员分别用CCL2和bFGF培养hiPSC，并对二者的转录组进行了比较分析。他们发现，在CCL2培养的干细胞中，低氧应答的相关基因表达水平更高，比如HIF2A (EPAS1)。这说明CCL2通过诱导类似低氧应答的反应，增强干细胞的多能性。这一发现将吸引研究者们，进一步探索细胞压力（例如低氧）与细胞多能性增强之间的关系。

领导这项研究的Yuki Hasegawa指出，“我们发现，表达差异最为显著的基因与低氧应答有关。事实上，低氧在肿瘤发展和多能性维持中的确有着重要的作用。我们的这项研究可以帮助人们进一步提高iPSC的质量，推动这些细胞在再生医学和疾病研究中的应用。”

研究还显示，与bFGF相比，CCL2培养的hiPSC分化效率更高。人们可以利用CCL2实现无滋养层细胞的hiPSC培养，防止病毒或其它污染物对干细胞产生影响。为了更好的利用CCL2，培养质量更加稳定的人类iPSC，研究人员还开发了一种特殊的培养皿，其上覆盖着连有CCL2的微珠。

 

日本研发新型iPS细胞培养技术 培养速度是目前的十倍 

2017-02-10 人民网报道，人民网东京2月10日电 据《朝日新闻》报道，日本京都大学和大阪GUNZE株式会社的研究团队近日成功开发出一种新的iPS细胞及胚胎干细胞（ES细胞）培养技术，培养速度是目前的十倍。

利用iPS细胞制作组织和器官需要培养大量细胞。然而，目前在培养皿中的培养量较小，在容器中加入多量的培养液加以搅拌的方法效率又比较低。

该研究团队的龟井谦一郎特定副教授等人使用明胶等，开发出了一种极细的布状纤维材料。将iPS细胞放在这种材料中培养，可在短时间内培养出高品质的iPS细胞。这种方法可将培养时间缩短至当前的五至十分之一，也可节约成本。龟井谦一郎表示：“今后会考虑增大这种材料的面积，以期实际投入使用。” 

 

当然，如果要进行IPS细胞重编程也是灰常方便的，

实验涉及原代细胞培养、电转、鉴定、支原体检测等等各种实验，

涉及的实验主要有以下产品清单：点击蓝字直接查看详情

货号	中文名称	包装量	单位
GP011020	iPS细胞重编程质粒套装	20次	支
货号	中文名称	包装量	单位
MP015100	皮肤成纤维细胞生长培养基	100ml	瓶
MP015500	皮肤成纤维细胞生长培养基	500ml	瓶
MP025100	尿液细胞生长培养基	100ml	瓶
MP025500	尿液细胞生长培养基	500ml	瓶
货号	中文名称	包装量	单位
AAB-1001	LONZA Amaxa电转仪	1	台
货号	中文名称	包装量	单位
KN015005	PBMC电转重编程试剂盒	5次	包
KN015025	PBMC电转重编程试剂盒	25次	包
KN025005	皮肤成纤维细胞电转重编程试剂盒	5次	包
KN025025	皮肤成纤维细胞电转重编程试剂盒	25次	包
KN035005	尿液细胞电转重编程试剂盒	5次	包
KN035025	尿液细胞电转重编程试剂盒	25次	包
货号	中文名称	包装量	单位
PG012010	重组人FGF2/bFGF	10ug	支
PG012100	重组人FGF2/bFGF	100ug	支
PG013001	重组人FGF2/bFGF	1mg	支
PR012005	重组人LIF蛋白	5ug	支
PR012020	重组人LIF蛋白	20ug	支
PR012100	重组人LIF蛋白	100ug	支
PR022010	重组人Activin A蛋白	10ug	支
PR022050	重组人Activin A蛋白	50ug	支
PR032005	重组人Noggin/NOG蛋白	5ug	支
PR032020	重组人Noggin/NOG蛋白	20ug	支
PR032100	重组人Noggin/NOG蛋白	100ug	支
货号	中文名称	包装量	单位
PA012050	兔抗人Oct4多抗	50ul	支
PA012100	兔抗人Oct4多抗	100ul	支
PA012200	兔抗人Oct4多抗	200ul	支
PA022050	兔抗人Nanog多抗	50ul	支
PA022100	兔抗人Nanog多抗	100ul	支
PA022200	兔抗人Nanog多抗	200ul	支
货号	中文名称	包装量	单位
GQ011001	人Oct4 qPCR引物对	1nmol	支
GQ021001	人Nanog qPCR引物对	1nmol	支
GQ031001	人GAPDH qPCR引物对	1nmol	支
GQ041001	人PAX6 qPCR引物对	1nmol	支
GQ051001	人FOXA2 qPCR引物对	1nmol	支
GQ061001	人MSX1 qPCR引物对	1nmol	支
货号	中文名称	包装量	单位
BF012050	Leucosep 12ml PBMC分离管	50个	包
BF013500	Leucosep 12ml PBMC分离管	500个	箱
BF022025	Leucosep 50ml PBMC分离管	25个	包
BF023250	Leucosep 50ml PBMC分离管	250个	箱
货号	中文名称	包装量	单位
KM012020	染色法支原体检测试剂盒	20次	盒
KM022048	PCR法支原体检测试剂盒	48次	盒
KM032010	发光法支原体检测试剂盒	10次	盒