【测评】PBMC分离培养封闭自动化系统—深研Cellsep pro使用报告

CellSep Pro细胞处理系统,是一种全封闭、高度自动化的细胞离心分离设备,可通过预设的工艺程序,实现细胞分离细胞复苏细胞浓缩洗涤细胞分装等。

 

CellSep Pro细胞处理系统·PBMC分离

技术原理

CellSep Pro处理过程中,将活塞式离心桶放入机器的离心单元内,和封闭无菌管路连接,通过气动装置、称重传感器等,将样品精确地导入活塞式离心桶内,在离心的作用下实现不同组分的梯度分离,然后通过推动活塞,并在旋转三通阀的配合下,将桶内的液体导出到不同的储液袋及细胞收集袋中。

 

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以单核细胞分离为例,离心筒内的血液在淋巴分离液(Ficoll)及梯度离心的作用下,由内至外依次被分为血浆层、单核细胞层、淋巴分离液层和红细胞层,通过活塞的上下移动,改变离心桶内的体积,控制液体进出。

 

 

技术优势

 

01技术优势

简捷、高效,细胞处理全流程一站式解决

 

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02技术优势

安全可靠的一次性、封闭管路无菌设计

 

CellSep Pro根据不同的工艺程序使用相应的 封闭式一次性管路耗材。封闭式一次性管路耗材与样品及 外部液体的连接需要在生物安全柜中 进行,或者使用无菌接管设备(SCD) 完成。

 

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一次性耗材管路示意图

 

封闭管路耗材的核心部件包括:活塞式离心桶、旋转三通阀 、储液袋、细胞收集袋滤器。CellSep Pro系统使用的封闭式一次性管路耗材均经过第三方权威机构的多项认证。

 

使用特定的工艺控制程序配合不同的封闭式一次性管路耗材,CellSep Pro 能够在封闭系统内完成多种细胞的分离、富集、浓缩、洗涤、置换、稀释等,且单次处理量更大,例如:PBMC分离程序的起始血量最低30mL、最高150mL,细胞洗涤程序起始细胞液量达到2000mL。

 

CellSep Pro可提供工艺(如离心时间、转速等)和管路耗材的定制开发。CellSep Pro高度自动化,其软件符合GMP规范,数据完整可追溯,具备欧盟CE认证。

 

 

03技术优势

简单科学易上手的软件系统

CellSep Pro软件操作系统简单易上手。更配置Linux 内核,用户可以根据自己的需求设置用户权限、工艺参数,而且细胞数据完整、可追溯,整套系统完全可保证您的细胞处理符合 GMP规范。

 

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设备参数

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PBMC(外周血单个核细胞)scATAC-seq(单细胞ATAC测序)是一种用于分析单个细胞中染色质可及性区域的高通量测序技术。这种技术可以帮助研究人员了解细胞类型特异性的基因表达调控和染色质结构变化,是研究细胞分化、细胞状态转换及疾病模型等的重要工具。 获取PBMC scATAC-seq数据通常包括以下几个步骤: 1. 样本准备:首先需要收集新鲜或冷冻保存的PBMC样本。这些样本可以是健康个体或病人的外周血,经过密度梯度离心等方法分离得到单个核细胞。 2. 单细胞分离使用流式细胞仪或其他单细胞分选技术,将PBMC进一步分离成单个细胞。这一步骤对于保证后续实验的高质量至关重要。 3. 核处理和标记:将分离得到的单细胞进行裂解,以释放出细胞核,并将细胞核标记上特异性条形码,这样在测序过程中可以区分不同的细胞。 4. ATAC-seq实验:利用ATAC-seq技术对标记后的单个细胞核进行处理,以打开染色质,并通过PCR扩增标记的DNA片段。 5. 库制备和测序:对扩增的DNA片段进行库制备,并在高通量测序平台上进行测序。 6. 数据分析:测序完成后,需要对原始数据进行质量控制、序列比对、峰值调用、条形码解码以及单细胞水平的分析,包括细胞聚类、差异可及性分析等。 在整个过程中,确保样本质量、实验操作的精确性和数据分析的准确性对于获取高质量的PBMC scATAC-seq数据至关重要。
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