FLUOR DE LYS® HDAC fluorometric activity assay kit组蛋白去乙酰化酶荧光活性检测试剂盒
目前,组蛋白去乙酰化酶抑制剂已经显示出其作为抗肿瘤药物的前景,这也自然激发了研究者们对于筛选HDAC(Histone deacetylase,组蛋白去乙酰化酶)抑制化合物的兴趣。Enzo的FLUOR DE LYS®HDAC荧光活性检测试剂盒(货号:BML-AK500-0001)是一种灵敏、便捷的组蛋白去乙酰化酶检测试剂盒,可替代使用传统的放射性标记的乙酰化组蛋白和肽/HPLC法检测组蛋白去乙酰化酶的方案。
FLUOR DE LYS®去乙酰化酶检测平台是Enzo的升级酶活性检测系列产品的基础,其中的产品就包括用于筛选HDAC(组蛋白去乙酰化酶)活性调节剂和Sirtuin(长寿蛋白,一种去乙酰化酶)活性调节剂的试剂盒。Enzo还可提供基于荧光共振能量转移(FRET)的试剂盒,用以检测基质金属蛋白酶(MMPs)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)的活性,以及提供基于磷酸特异性抗体的激酶检测试剂盒。
这些检测证明了Enzo在组装小肽、合成活性重组蛋白、荧光标记和检测技术,以及抗体开发等多方面协同的能力,也保障了Enzo能够生产出功能强大且重复性好的检测试剂盒。
Enzo的酶活性检测试剂盒均具有以下特点:
高品质:高活性、高纯度的重组酶,可呈现高质量的底物结合效果
灵活性:批量酶和底物可用于筛选后研究
强创新:多种readout 格式的专利底物/显影剂化学物质
作用机制:
FLUOR DE LYS® HDAC fluorometric activity assay kit基于Enzo特有的 FLUOR DE LYS®(荧光法组蛋白去乙酰化酶-赖氨酸)底物和显影剂组合,只需2步简单的混合步骤,即可在同一个96 孔板上进行检测。首先,将含有乙酰化赖氨酸侧链的FLUOR DE LYS®底物与含有HDAC活性的样品(HeLa核或其他提取物、纯化酶、珠结合免疫复合物等)一起孵育。底物的去乙酰化会使底物增敏,所以在第二步中,将其与FLUOR DE LYS®显影剂混合后会产生荧光团。
该检测方法目前已经成功用于所有已知的I类HDAC——HDAC1、HDAC2、HDAC3和HDAC8(见产品数据表)和II 类HDAC 4-7、9和10,以及人类Sir2同源物和SIRT1(见产品数据表)的制备。Enzo Life Sciences的研究表明,FLUOR DE LYS®底物具有细胞渗透性,并可在原位被细胞HDAC去乙酰化。脱乙酰化的底物在细胞内积聚后,可通过向细胞裂解液中加入FLUOR DE LYS®显影剂进行定量测定。