胎牛血清的解冻技巧

解冻胎牛血清是生物实验中常见的操作之一。正确的解冻方法能够保证胎牛血清的活性和稳定性,确保实验结果的准确性。首先,选择合适的解冻工具和容器非常重要。其次,将冻存的胎牛血清置于4摄氏度冰箱中缓慢解冻,避免温度变化过快导致蛋白质变性。解冻后,可以通过离心等方法去除沉淀物,得到干净的胎牛血清。最后,分装成小份,避免多次冻融影响品质。正确的胎牛血清解冻技巧能够提高胎牛血清的利用率,为科研工作提供有力支持。

在血清这种混合物中,融化速度:蛋白质等干物质>水这类溶剂。所以在胎牛血清解冻的过程中,蛋白质会率先溶解析出,而水还是结成冰的状态,导致瓶子中间会出现一根透明的冰柱,而周围则会呈现上黄下红的分层浑浊液的状态,在使用过程中很容易引起沉淀、混合不均匀、局部浓度过高等问题,影响细胞生长。

以下是胎牛血清解冻技巧

胎牛血清中珍贵的生长因子等活性物质,它们在解冻过程中,有着与细胞复苏类似的经历,都需要快速解冻才能最大程度地保留生物活性。显然,4℃过夜这样的长时间处理,很有可能会导致一部分「营养成分」的损失,影响细胞生长。所以,为了更好地保留胎牛血清中的活性成分,使细胞培养更稳定,我们推荐使用三步法胎牛血清解冻技巧,具体方法见下表。

如果是储存在-80℃的胎牛血清,则需提前几天先转移至-20℃冰箱中(至少24小时),再使用三步法溶解,避免温差过大使血清失活。

注:此方法国际通用,适用于所有培养基,在水浴过程中,胎牛血清的平面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动瓶身,使血清混匀,但摇动中尽量不要产生泡沫!

    在按照胎牛血清解冻技巧彻底解冻胎牛血清后,可以根据实验需求,将其分装,保证每一份够一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后赶紧放回-20℃冰箱继续储存。需要配制培养基的时候,再从-20℃冰箱中取出一管来解冻使用(尽量能全部配成培养基,不要有剩余),可以有效避免反复冻融的问题(遵循现用现配、现配现解冻的原则)。配好的培养基可以放到4℃冰箱进行储存。

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