点成分享 | DNA提取需要了解的三个知识点

前言

20世纪50年代以后，随着分子遗传学的发展，尤其是沃森和克里克提出DNA的双螺旋结构以后，人们才真正认识了基因的本质，即基因是具有遗传效应的DNA片段。

随着“人类基因组计划”测序的完成，人们不再满足于对基因结构的认知，逐渐转向对功能基因组学、蛋白质组学的研究上，DNA作为遗传的基本单位发挥着重要作用。

基于不同的研究目的，大部分的分子实验都需要制备高质量的DNA,用于各种各样的后续实验。例如，通过PCR获得目的基因、酶切、克隆、连接、转化、转染、研究DNA和蛋白的相互作用等。因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要，也是最基本的操作。

在应用上，提取的DNA可用千基因组作图、进化分析、模式生物体的基因敲除、转基因的研究。在分子医学领域，制备DNA的基因检测可用千法医鉴定、亲子鉴定、遗传病早期检测、感染疾病检测、肿瘤的诊断和预测、产前诊断和新生儿筛查等。

 

三个知识点

 

Part1. DNA基础知识

• 细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子，均与蛋白质结合成核蛋白。

• 真核生物的DNA分为染色体DNA（双链线性）与细胞器DNA（双链环状）。

• 在原核生物中还有质粒DNA（双链环状）；在非细胞型病毒颗粒内，DNA存在的形式却多种多样。

 

  

Part2. DNA提取总则

• 保证核酸一级结构的完整性；

• 其他生物大分子的污染应降低到最低程度；

• 样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；

• 应尽量去除其他核酸分子，如RNA。

 

Part3. 核酸的理化性质

• 极性化合物，溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，钠盐比游离核酸易溶于水。

• 在酸性溶液中，DNA、RNA易水解，在中性或弱碱性溶液中较稳定。

• 天然状态的DNA是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。