WB 方案设计技巧

WB 实验常常让人头疼，不是没结果就是趋势不对，即使做了很多优化调整，结果却仍不尽人意。这是因为我们的关注点往往是 WB 步骤有没有出错，而从来没有部署过 WB 的全局。其实做 WB 前，我们需要做一次 WB 设计！没错，临床试验需要设计，WB 也需要设计，只有把整体的实验设想进行合理地规划才能获得最佳的实验结果。那如何做 WB 设计呢？ 

第一件要做的事情就是知己知彼！

一

了解你的目标蛋白

我们首先需要收集目标蛋白以下信息：

1. 目标蛋白的名字

2. 目标蛋白在哪些组织中表达，是否具有特异性

3. 目标蛋白的分子量

4. 目标蛋白在细胞中的表达位置及表达量

5. 是否有相应的抗体

如何获取这些信息呢？除查询文献外我们可以借助生物信息学方法及一些产品信息获取相关信息。例如使用 Uniport，维基百科，NCBI，ExPASy 等进行查询。还可以通过相应抗体产品提供的信息进行查询。

了解了目标蛋白以上内容后，我们就可以开始做 WB 设计啦！

二

WB 方案设计

1. 首先明确实验目的，为什么要做这个 WB 实验？要验证哪些问题？

例如：是想验证目标蛋白的表达情况？还是要验证目标蛋白在细胞几个不同组分中表达差异？或者是进行蛋白定位、蛋白转运过程的研究？

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