细胞培养过程中时常会出现这样或那样的问题,别小看细胞培养,里面却蕴含着大学问.通过与使用者沟通你会发现了很多可以避免的问题发生,下面对细胞培养过程中存在的几大误区做详细解析.
误区一:
XX实验室培养XX细胞用的就是这个培养基,我用一样的就可以
•选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:
首选:建立该细胞株所用的培养基
参考:文献
尝试:实验室常用的培养基
按需:根据细胞株的特点、实验的需要来选择
最客观:用多种培养基培养,根据实际效果选择,但较繁琐
误区二:
长期使用抗生素,以对抗污染
解析:
•细胞培养时不应常规使用抗生素
•连续使用抗生素会促进抗生素耐药性细胞株的产生,导致轻度污染持续存在,一旦将抗生素从培养基中去除,这种轻度污染最终将发展成大规模污染
•连续使用抗生素会掩盖支原体感染及其他隐性污染
•有些抗生素会与细胞发生交叉反应,干扰您研究的细胞过程
误区三:
培养基中的谷氨酰胺容易降解,需要不断补充
解析:
如果正确使用,一般不需要补加
•4℃避光保存
•分装,不要反复预热
•含有谷氨酰胺的培养基,开封后应尽快用完
误区四:
培养基误存于-20℃,溶解后继续使用
解析:
•在-20℃下,培养基中的盐容易析出,培养基再次融化后,有的盐可能无法重新溶解,从而导致培养基营养成分和渗透压改变,培养细胞时,容易细胞破裂而死亡。
•建议丢弃该培养基,重新购买新的培养基用于细胞培养.
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