Centrinone (LCR-263) 是 polo 样激酶 4 (PLK4) 的选择性可逆抑制剂 |MedChemExpress (MCE)

CAS：1798871-30-3

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：Centrinone (LCR-263) 是 polo 样激酶 4 (PLK4) 的选择性可逆抑制剂，Ki 为 0.16 nM。 IC50 和目标：Ki：0.16 nM (PlK4)[1]  

体外：Centrinone (LCR-263) 对 Plk4 的选择性是 Aurora A/B 的 1000 多倍，并且在耗尽中心体的浓度下不影响细胞 Aurora A 或 B 底物磷酸化。用 Centrinone (LCR-263) 处理 HeLa 人宫颈癌细胞会导致在每一轮细胞分裂中含有中心粒和中心粒周围物质标记的病灶逐渐减少，直到大多数细胞缺乏中心粒和中心体。用 Centrinone (LCR-263) 处理可减少多纤毛 非洲爪蟾 上皮细胞中的中心粒数量，这表明 Plk4 还控制分化细胞中的中心粒扩增。 Centrinone (LCR-263) 处理会导致人类和其他脊椎动物细胞的中心体耗竭。中心体丢失通过 p53 依赖性机制不可逆地阻止正常细胞处于衰老样 G1 状态，该机制独立于 DNA 损伤、压力、Hippo 信号、延长有丝分裂持续时间或分离错误[1]。

激酶试验：纯化的 6xHis 标记的人 Plk4 激酶结构域位于 20 mM Tris pH 7.5、100 mM NaCl、10% 甘油、1 mM DTT 中。 2X 反应缓冲液由 50 mM HEPES pH 8.5、20 mM MgCl2、1 mM DTT、0.2 mg/mL BSA、16 μM ATP 和 200 μM A-A11 底物组成。最终反应中的 Plk4 浓度为 2.5-10 nM，最终 pH 值为 8.0。剂量反应中的抑制剂（Centrinone）阵列是从 DMSO 库存中添加的。反应在 25°C 下进行 4-16 小时。使用 ADP-Glo 试剂进行检测。发光是在读板器上测量的[1]。

细胞试验：对于每种条件，将细胞以 50,000 个细胞/孔一式三份接种到 6 孔板中。将 125 nM Centrinone (LCR-263) 添加到 HeLa 细胞中，或将 300 nM Centrinone 添加到 NIH/3T3 细胞中。每个条件每隔 24 小时收获 3 个孔。使用 TC10 自动细胞计数器进行细胞计数[1]。

参考详情：www.medchemexpress.cn/Centrinone.html

参考文献：

[1]. Wong YL. et al. Cell biology. Reversible centriole depletion with an inhibitor of Polo-like kinase 4. Science. 2015 Jun 5;348(6239):1155-60.