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分子生物学复习资料及往年考题

0.2023年复习题及考试重点

更新中~

1.2022复习题

1.分子生物学复习资料及往年考题：（已完结）
（1）资料完整版下载链接：（待更新）
（2）重点内容总结：
（3）更新须知：
2022.12.07

中国科学技术大学生命科学学院系
2021-2022 学年第 1 学期考试试卷

课程名称： 分子生物学 课程代码：____
院系：___________________________ 考试形式：闭卷
姓 名： 学 号： 专 业：
题 号 填空题 选择题 名词解释 问答题 总分
得 分 100分

一、填空题（1分/空）
Genotype （Inducer absent）
β-galactosidase Permease (Inducer present）
β-galactosidase Permease
I-P+OcZ+Y-
I+P+O+Z-Y+ （ ） （ ） （ ） （ ）
I+P-O+Z-Y+
I-dP+O+Z+Y- （ ） （ ） （ ） （ ）
I+P+OcZ-Y+
I-P+O+Z+Y- （ ） （ ） （ ） （ ）

2.乳糖操纵子的阻遏蛋白有两个结构域，一个是DNA结合结构域, 另一个是_____。酵母中乳糖的利用其中有一个启动蛋白它有两个结构域，一个是DNA结合结构域，另一个是_____, 与其作用位点是_____。
3.λ噬菌体的即刻早期基因有_____和_____。在裂解途径中它会转录出头尾蛋白及相关的裂解蛋白，这些蛋白转录的启动是由哪一个抗终止基因完成：？
4.蛋白质异形体的产生主要是哪两种机制：和？
5.实时定量PCR有两种荧光探针是_____和。其中第1种有一个荧光基团，还有一个淬灭基团。后一种主要结合DNA双链。
二、选择题（2分/题）
1.RecA是大肠杆菌中recA基因座的产物，具有双重功能，能激活蛋白酶并能改变单链DNA分子，关于RecA的说法不正确的是（ D ）
A.RecA蛋白参与大肠杆菌所有的同源重组途径，有单体和多聚体两种形式
B.RecA是大肠杆菌中recA基因座的产物，具有双重功能.
C.RecA具有核酸酶活性涉及重组修复途径。
D.RecA在剪切修复过程中发挥作用

2.ARE序列存在于许多mRNA的3’非翻译区（3‘UTR）中，包括原癌基因、转录因子、细胞因子的mRNA。它的功能是（ B ）
A.反式调控 B.调控.RNA稳定性 C.AUUUAG重复序列

3泛素－蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system, UPS）是细胞内蛋白质降解的主要途径，参与细胞内80%以上蛋白质的降解。以下说法错误的是（ C ）
A.泛素含有76个氨基酸残基，分子量约8.5kDa，广泛存在于真核细胞
B.泛素化涉及三个主要步骤：活化，结合和连接，分别由泛素激活酶（E1），泛素结合酶（E2s）和泛素连接酶（E3s）执行
C.E3泛素连接酶的半胱氨酸活性位点与被E1泛素激活酶转移的泛素形成硫酯键

4.对P53的解释，下面哪个是错误的 ( C )？
A.p53是抑癌基因
B.P53基因编码的蛋白质（protein）是一种转录因子（transcriptional factor），其控制着细胞周期的启动
C.p53作为“基因组卫士（guardian of the genome）”，在G1期检查DNA损伤点，监视基因组的完整性。如有损伤，p53蛋白阻止DNA复制，以提供足够的时间使损伤DNA修复；P53发挥作用的原理是野生型P53以二聚体形式与特异位点结合，反式激活 下游生长抑制基因的表达.
D… 细胞中抑制癌变的基因“p53”会判断DNA变异的程度，如果变异较小，这种基因就促使细胞自我修复，若DNA变异较大，“p53”就诱导细胞凋亡。

解析：P53作用机理是野生型P53以四聚体形式与特异位点结合，反式激活下游生长抑制基因的表达。一系列的方式能使P53失活，在一些肿瘤中，单一或两个 P53位点的丧失降低四聚体浓度，无义突变造成P53翻译中断，C端酸性结构域的丢失 影响四聚体形成；最常见的是错义突变，野生型与突变体形成更稳定的四聚体，丧失 正常功能。

5.LexA出现在哪一个DNA修复机制之中？（ B ）
A.光修复 B.SOS应答 C.碱基切除修复 D.错配修复

解析：LexA是阻遏SOS应答的，DNA严重受损后无法由直接修复错配修复等途径修复。就启动SOS修复机制，而SOS系统的基因在平时就是由这个LexA蛋白阻遏沉默的
修复过程是RecA蛋白与DNA的单链缺口结合，然后被激活成蛋白酶，这个蛋白酶能将LexA切除成无活性的俩个片段，这样就启动了SOS应急系统，把DNA强制修复得以继续复制。当然这样的错误率很高。
当修复完成后，RECA蛋白恢复非蛋白水解酶形式，LexA蛋白又逐步积累起来，这样就又建立了阻遏作用。
DNA修复机制的分类：
1.直接修复（光修复）细胞在酶的作用下，直接将损伤的DNA进行修复。 修复是由细菌中的DNA光解酶（photolyase）完成
2.核苷酸切除修复、碱基切除修复 利用DNA聚合酶校读功能（3’-5’外切酶活性）进行修复
3.切除修复（暗修复）碱基切除修复
2个Uv r A 和1个B扫描DNA双链并找到碱基损伤的片段，继而Uv rA解离，Uv r C结合，UvrB在3’端切除4-5个核苷酸，在5’端UvrC切开8个核苷酸，解旋酶Uv r D结合，并释放损伤链，由DNA聚合酶I合成，然后DNA连接酶进行连接。
4.甲基化介导的错配修复（DNA 聚合酶III完成切除的链的合成）
甲基化介导的错配修复：MutS/L在新合成的链捕获碱基错配位点的DNA，Mut L移动以找到甲基化后 ，MutS、MutL complex形成DNA-looping与mut H相互作用，通过Mut H切开非甲基化的子链DNA，继而由DNA聚合酶III合成新的子链片段，由DNA连接酶进行连接。
5.SOS应答
许多被诱导的基因表达产物参与了DNA修复并诱发突变。关键的调控因子是RecA蛋白和LexA阻抑物。

6…基因工程操作的步骤顺序为（ B ）。
A.酶切-连接-增殖-转化-检测
B.酶切-连接-转化-增殖-检测
C.连接-酶切-转化-增殖-检测
D.连接-酶切-转化–检测-增殖

解析：基因工程操作的步骤顺序为 剪，接，增，转，检。剪，接.
剪是用限制性内切酶分别去切割载体跟插入片段。
接是将目的片段跟载体连接到一起。
增：是让目的质粒扩增的过程。
转：将外源质粒转入细胞中。
检：是指对目的片段在细胞中基因组的整合情况的检验。

三、名词解释
1.代谢抑制（catabolite repression）
代谢抑制（catabolite repression）分解代谢物抑制作用又称代谢物阻遏作用，是葡萄糖或代谢物或葡萄糖的降解产物对一个基因或操纵子的阻遏作用。当培养基中同时含有葡萄糖和乳糖时，由于细菌生长优先利用葡萄糖，lac操纵子的表达就会被葡萄糖抑制，这种现象称为分解代谢物抑制。
2.表观遗传（epigenetics）
表观遗传学（epigenetics）则是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下，基因功能发生了可遗传的变化，并最终导致了表型的变化。包括2个水平的调控：基因选择性表达水平调控和转录后调
3.细胞分化（Cell Differentiation）
细胞分化(Cell Differentiation)指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达，通过不同基因表达的开启或关闭，最终产生标志性蛋白质.
4.抑制突变（Suppressor mutation）
抑制基因突变(suppressor mutation)是第一次突变产生的表现型常可由第二次突变使野生型的表现型得以恢复（并非真正的回复突变）。抑制基因突变使第一次突变所产生的失活蛋白质回复至原来的具活性（或部分活性）的蛋白质
5.限制酶(Restriction Enzymes)
限制酶(Restriction Enzymes) 一般指限制性核酸内切酶。 限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶
6.PCR。

四、问答题
1.在色氨酸操纵子中，根据色氨酸的浓度、核糖体的位置及RNA的二级结构解释其衰减模型。并解释这种机制为什么在原核中可以，在真核中就不可以。
1．色氨酸操纵子结构：色氨酸操纵子包含操纵基因O，启动子P，及5个结构基因A、B、C、D、E.E与O之间有一段前导序列L。色氨酸操纵子上游存在调节基因trpR，编码阻遏蛋白。
2. 阻遏调控（阻遏蛋白操纵子系统）：当培养基中无色氨酸时，R编码的阻遏蛋白不与O结合，结构基因表达催化合成色氨酸的酶。当培养基中有大量色氨酸时，阻遏蛋白与色氨酸结合而改变构象，形成活性阻遏物,与O结合，阻遏结构基因转录。【减少转录约70倍】
3. 衰减调控（衰减子系统）：L中含有4段特殊序列：序列1编码一个前导肽，前导肽的第10、11位是色氨酸；序列2-3或序列3-4可形成茎环结构。3-4茎环结构是一个转录终止子结构，称为衰减子。
当色氨酸缺乏时，前导肽的翻译停滞于色氨酸密码处，序列2-3形成茎环结构，使序列3、4不能形成衰减子结构，结构基因得以完全转录；当色氨酸充足时，核糖体快速翻译前导肽，并对序列2形成约束，使序列3-4形成衰减子结构，下游的结构基因不被转录。【减少转录约8-10倍】
真核生物中不存在（色氨酸）操纵子结构的原因
（1）操纵子是原核生物为适应环境变化而进化出的一种机制，在外界环境发生不利变化(如能源物质缺乏或改变)时，通过调节基因产物的表达来适应环境变化。作为比原核生物复杂和高等的生物，外界环境对其影响要比原核小，不需要操纵子这类适应机制。
（2）原核生物边转录边翻译，色氨酸操纵子可以进行调控，而真核生物是先转录后翻译。
2.简述三种可以与DNA结合的蛋白结构域的主要特征。

3.突变按照原因可以分为自发突变（Spontaneous mutations）和诱发突变（Induced mutations:），它们产生的原因。
1.自发突变：
（1）DNA复制产生的错误，10-10-10-9的碱基错误率
①Base pair substitution mutation ②Additions and Deletions
（2）自身产生诱变物质的化学改变
①Depurination（脱嘌呤作用