牛血清白蛋白偶联琼脂糖珠 BSA-Sepharose beads
描述:
牛血清白蛋白偶联琼脂糖珠(Bovine Serum Albumin-Agarose Beads, BSA-Agarose Beads)是一种常用于生物分离和纯化的工具,通过将牛血清白蛋白(BSA)偶联到琼脂糖珠上,可以用于免疫分析、蛋白质纯化和酶反应等生物实验。制备过程通常包括以下步骤:
首先,将琼脂糖珠进行活化。常用的活化剂包括NHS-活化的琼脂糖珠或氰溴化物(CNBr)。对于NHS-活化的琼脂糖珠,可以直接按照厂商说明进行操作;对于CNBr活化,需要在碱性条件下(如1M NaOH)处理琼脂糖珠,然后用冰冷的CNBr溶液进行活化。
其次,将BSA溶解在适当浓度的PBS缓冲液中,并将其加入到活化的琼脂糖珠中,混合均匀。反应混合物通常在4°C下旋转反应4至16小时,以确保BSA与琼脂糖珠充分偶联。为了封闭未反应的活化位点,可以加入适量的乙醇胺或其他封闭剂,并继续反应1至2小时。
*后,使用PBS缓冲液反复洗涤偶联后的琼脂糖珠,去除未结合的BSA和其他反应副产物。洗涤后的BSA琼脂糖珠悬浮在PBS中,添加0.02%的叠氮化钠作为防腐剂,并在4°C保存。
BSA偶联琼脂糖珠具有多种应用。它们可以用于固定抗体或抗原,应用于免疫沉淀和免疫纯化;利用BSA的结合特性,还可以纯化特定的蛋白质或酶。此外,将酶固定在BSA偶联琼脂糖珠上,可以提高酶的稳定性和重复使用性。这种多功能的实验工具在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。
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