ATR1激动剂激活 β-Arrestin 通路可促进肾小球细胞中的钙内流 AbMole

Angiotensin II 受体阻断剂（ARBs）通过抑制Angiotensin II G蛋白偶联受体（GPCR）的信号传导。然而，ARBs 可能引起一些副作用，如血管性水肿和肾血流动力学变化。因此，寻找新的ARBs以减少这些副作用是高血压研究的重要目标。

β-arrestins是细胞内蛋白，通过广泛的适配器功能和与GPCR的直接相互作用促进信号传导。TRV120027（AbMole M10146）是一种偏向性AT1R激动剂，选择性激活β-arrestin级联并阻断GPCR信号通路，被认为具有潜在的降血压作用。尽管在动物模型中显示出改善心血管不良症状的潜力，但对于β-arrestin信号通路在肾脏和肾细胞特异性信号效应中的作用，目前了解甚少。

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研究人员对β-arrestin信号通路在肾小球细胞（podocytes）中的激活如何通过选择性ATR1（Angiotensin II type 1 receptor）激动剂TRV120027促进钙离子（Ca2+）内流，进而导致肾小球损伤的机理进行了深入的研究。

TRV-120027 (TRV027) 是一种血管紧张素 II 受体 1 型 (AT1R) 的 β-arrestin-1 激动剂。TRV120027 TFA 通过阳离子通道亚家族 C3 (TRPC3) 偶联诱导急性儿茶酚胺分泌，促进质膜上 AT1R-β-arrestin-1-TRPC3-PLCγ 形成大分子复合物。TRV120027 TFA 抑制血管紧张素 II 介导的血管收缩并增加心肌细胞的收缩力。

研究使用人类肾小球细胞系来确定β-arrestin在钙信号和细胞骨架重组中的作用，并使用Dahl SS大鼠来研究TRV长期给药对肾小球健康的影响。

使用Fluo-4 AM、Fluo-8 AM或DAF-FM荧光染料标记细胞，并通过共聚焦显微镜观察TRV应用前后的细胞内钙和一氧化氮（NO）的变化。使用膜片钳技术记录TRV对TRPC通道活性的影响。使用罗丹明荧光素染色法观察细胞骨架的变化。通过TUNEL染色和Western blot分析凋亡相关蛋白的变化。在Dahl SS大鼠上进行TRV的慢性给药，收集尿液和肾脏样本进行组织学染色、电子显微镜检查和生化分析。

实验表明，TRV激活的β-arrestin通路以剂量依赖的方式促进细胞内Ca2+的快速升高，而没有观察到NO的产生。这种β-arrestin介导的Ca2+内流的幅度显著高于类似浓度的Ang II（Angiotensin II）。

单通道分析显示，TRV的急性应用迅速激活瞬时受体电位典型（TRPC）通道。药理学阻断TRPC6显著减弱了β-arrestin介导的Ca2+内流，而TRPC5通道不参与此过程。

长期激活β-arrestin通路导致肾小球细胞的病理性肌动蛋白骨架重组、凋亡细胞标志物的增加以及肾小球损伤的加剧。在Dahl SS大鼠的体内实验中，TRV的慢性给药导致了显著的肾小球损伤评分增加、蛋白尿和尿白蛋白的升高，以及电子显微镜下观察到的肾小球基底膜（GBM）厚度的减少和足细胞足突的恶化。

这些发现表明，尽管TRV120027在动物模型中显示出降低血压的潜力，但其在肾小球细胞中的β-arrestin偏向性激活可能导致严重的肾小球滤过屏障缺陷和肾脏健康问题。因此，TRV作为高血压潜在应用需要进一步研究，以评估其益处与可能的有害效应和非靶点损伤之间的平衡。

未来的研究需要进一步探索β-arrestin信号通路在肾脏中的作用，还应关注β-arrestin信号通路在其他肾脏疾病中的潜在作用，以及可能的靶点和对应策略。

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