Image J 和传统软件不太一样,它把标题栏、菜单栏、工具栏和状态栏集中放在一起,并没有把工作区框起来,而是打开图片之后,以图片悬浮的方式作为各自的工作区。

操作界面

操作步骤

结果显示
尽可能的将亮色区域圈起来,圈的范围不能太大,要比较精准,不然误差会很大。
当测定完所有条带,选结果中的“Edit”的“Select All”,然后复制数据“IntDen”到Excel表即可进行分析。也可以直接在Results对话框中,选择File → Saveas,直接导出excel表格。

导出至EXCEL后
在excel表格中将目的蛋白的灰度值除以内参蛋白的灰度值,进行归一化处理。

目标蛋白处以内参
在GraphpadPrism软件中作柱状图。

经过灰度统计分析后得到的结果更准确更有说服力,是不是感觉上升了一个档次呢?
科研人员做的western blot实验一般需要对其结果扫描后进行灰度分析,一般使用的软件为Image J,搜索免费的资源下载后就可以使用喽。