1.冷冻电镜单颗粒 的冰层厚度大约20nm-200nm之间
2.tomo的极限分辨率是20埃,因为电子剂量被分的比较多,-70~70每三度取一个照片,信息很低
3.随着照片的增加,类似于数字图像处理,噪声会弱化掉,而信息会增强,也增强了信噪比,提升图像分辨率(细节信息),可以提高根号下照片的张数4.为什么选择冷冻,因为冷冻下可以提升电子剂量,还有就是如下辐射损伤,时间尺度1~10 ps, 包括电荷离域、化学键断裂、二次电子产生、自由基产生等;不产生显著的结构信息变化,对最终观察到的辐射损伤贡献有限。
4.铜网大小3mm
5.三个诺奖得主的贡献:冻样,数据处理和数据采集(ddd)
6.电镜下的颗粒是黑色的,灰度值低的表现,但是二维分类后的蛋白包括轮廓是白色的,因为两点,一个是历史原因:高分辨率的颗粒要求是白色的,二是由于像素叠加,照片平均可以提高分辨率,100张低信噪比的照片可以提高到3A
7.高频信号衰减特别快,所以X-ray不能承受高剂量电子
8.DDD相机的前几张照片都用不了,分辨率较低
9.一般电子剂量为60埃每平方埃
10.相位板的使用就是能不用就不用,如果不需要就可以解高分辨,就不要用
11.铜网有孔,孔内有SQUARE
12.CCD相机不如film
13.EMAN的使用需要改源代码,但是现在在往深度学习和subtommo上发展,发展的很好