二代测序技术比较:
公司 | 平台名称 | 测序方法 | 检测方法 | 读长(bp) | 优点 | 相对局限性 |
罗氏/454 | 基因组测序仪FLX系统 | 焦磷酸测序法 | 光学 | 230-400 | 二代测序中读长最长;比一代测序通量要大 | 样品制备较难;难于处理重复和同种碱基多聚区域;试剂冲洗带来错误累积;仪器昂贵; |
Illumina | HiSeq2000(4000)/Miseq | SBS | 荧光/光学
| 2x(150-300) | 很高测序通量; | 仪器昂贵;用于书记胡删节和分析的费用很高 |
ABL/SOLiD | 5500x|SOLID系统 | 连接测序法 | 荧光/光学 | 25-35 | 高通量测序,二代测序平台中,拼接人类基因组的试剂成本最低 | 测序运行时间长;读长短,造成成本高,数据分析、拼接困难;仪器昂贵 |
Life Technology | PGM/Proton | SBS | 以离子敏感场效应晶体管验测PH值变化 | 100-200 | 对核酸碱基的参入可直接测定;在自然条件下进行DNA合成(不需使用修饰过的碱基) | 一步步洗脱过程导致错误累积;阅读高重复和同种多聚序列时有潜在困难 |
Complete Genomics | Blackbird | cPAL | 荧光/光学 | 100 | 通量高;成本低;单测序步骤独立,使错误累积最低 | 低读长;模板制备妨碍长重复序列区域测序;样品制备费事 |