我们前几天推送了Graphpad prism的简明使用教程（科研论文作图之Graphpad Prism ）。有个小伙伴问我们在他的论文中该使用那个图比较好。小编想起来以前写过一些相关的推送，今天就先跟大家详细总结一下我们试验数据统计中常用的 量，图，和线。有了这些基本知识，再结合我们上边介绍的软件，相信可以解决大部分的一般统计图表问题。
如果不想看下边的长篇大论，请看小编给您总结的懒人包：
标准差：
群体的标准差是群体中所有数据方差的平方根，它衡量的是群体中某个测量值的离散程度。
我们可以看到下面左图中三个群体(正态分布曲线)的某个测量值的均值是相同的（x = u），但测量值的离散程度不同(标准差不同)。右边的图大家应该比较熟悉，它的意义是判断某个值是否是小概率事件，比如某个个体的测量值在三个标准差之外，我们就说这个数据点是个小概率事件（p< 0.01）,在我们试验中也即意味着这个数据是个outlier，很有可能是混杂的种子，或者是测量出错了，数据输错了。
用于描述这种测量值离散程度的图大多为Histogram（直方图）和Box plot（箱式图）。我们以后再介绍这两个图，尤其箱式图，是一个很不错的工具。
这里要特别提醒一下：以上举的例子是以整个群体为对象的，但在我们实际操作过程中，我们拿到的数据一般都只是一个群体中的一部分样本（比如一个200个RIL的作图panel是从所有可能的RIL个体中随机挑选出来的），对于样本的标准差的公式如下：分子是n-1,而不是n。所以大家在Excel中计算SD的时候应该用STDEV.S，而不是STDEV.P。
均值的标准误：
接下来我们来看标准误。标准误衡量的是样本均值的离散程度，可以用来衡量样本的均值和整个群体实际均值之间的差别。也就是标准误越小，就说明样本的均值越接近于整个群体实际的均值。下面是标准误的计算公式，我们可以看到所取的样本量越大，标准误就越小，我们得到的均值就越接近于整个群体实际的均值。
基于SEM的这个统计学意义，当我们用t-test 测验两个样本均值是否有差异时，在均值上添加SEM更恰当，而非SD。当然，不得不说的是，现在大部分RNA表达的图都是用柱状图和标准差来做，我想其中一个罪魁祸首就是Excel吧，竟然没有直接SEM的计算公式，我以前用Excel处理数据时就只知道Average和SD，自然而然的就就采用这两个来做图了。另外一个原因也是现实情况所致，当一个试验的样本量特别大的时候，SEM就会非常小，甚至接近于0，画在柱状图上就看不到了，这也是有人选择标准差做error bar的原因吧。
均值的置信区间：
另外描述均值分布的还有均值的置信区间（Confidence Interval of the mean），用来估计均值误差范围的区间。它的计算公式如下：
其中S/√n为标准误，t = TINV(0.05, N-1), N 为样本大小，在Excel中输入此公式就可以得到t值，然后再代入均值置信区间的公式。从下面的t表来看，当样本量足够大时，t接近c的值1.96（a=0.05），这个c值用于大家平常在网上查到的均值置信区间的公式（如下），但我们平常的试验单因素样本量很少能达到500，所以此公式慎用。
至于原因以及关于均值置信区间的计算公式的推导，具体参考这篇文章：置信区间的求法
另外，从这个表中，我们也可以看到，当样本量小于10的时候，置信区间范围将比SD还要大。大家可以根据SD，SEM和CI of the mean三者的公式自行推算。
这里要注意标准误（Standard Error：SE）和置信区间（Confidence Interval：CI）都只是一个统称，它们既可以描述均值，也可以描述中位数，甚至可以描述标准差。也就是说在文章中SE和CI后面一定要有定语。只有当它们用于描述均值的时候才成了Standard Error of the mean（SEM）和CI of the mean。
另一点要注意的是：判断两组数据的均值差异是否显著，不能只看均值大小，误差线，或者p值；而是应该结合起来看：当样本比较少时，标准误也就大，这时计算的p value可能不显著，但增加了样本数量后，标准误降低了，p值可能就显著了。
小提琴图示例
说了这么多理论，下面我们用三种图（柱状图，点状图和小提琴图）来展示一下SD, SEM,和CI of the mean 之间的区别。下面用到了三组数据：左边的和右边两组是极显著差异，右边两组没有显著差异。
1.左图是柱状图加SD，右边是小提琴图加SD。本来好好的极显著差异就这样被埋没了：尤其是柱状图加SD，很难看出极显著。
2.左图是柱状图加SEM，右边是小提琴图加SEM。加SEM显然要比SD“好看”很多。尤其是小提琴图，由于比柱状图在纵坐标上有优势，看起来就是极显著。但加SEM也有“缺点”，第二组和第三组数据的均值有差异，而且SEM没有重叠，给人一种二者也是显著差异的感觉。
3.左图是柱状图加CI of the mean，右边是小提琴图加CI of the mean。对于这三组数据，最佳方案就是均值加均值的置信区间了。完美的避免了上面所提到的缺点：既可以明显看出极显著差异，又可以化解不显著的差异。
有没有老师告诉过你：误差线重叠，差异就不显著了！下面我们给你总结了最全面的说法：
置信区间没有重叠，二者肯定有显著差异。但置信区间有重叠，不一定说明二者没有显著差异。
标准误有重叠，二者肯定没有显著差异。但标准误没有重叠，不能说明二者就一定有显著差异。
点状图示例：
另一组示例，还是左边的和右边两组是极显著差异，右边两组没有显著差异。这个示例主要是看当样本量很小时（比如RNA 表达实验），采用SEM更恰当，因为CI of the mean太大了。。。三个图从左到右依次为点状图加SD，SEM，和CIof the mean.
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