graphpad细胞增殖曲线_牛血清在细胞培养时的注意事项

胎牛血清参与细胞培养实验为细胞生长提供必要的营养成分，对于研究细胞的科学人士来说，血清都不会陌生，其中胎牛血清是实验操作的常客。一般而言，胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后，发育未完全的胎牛心脏穿刺采血后，通过一系列工艺处理zui终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子，一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。

各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。

1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。

2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）

3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）

4、无菌检验 阴性

5、支原体检验 阴性

6、细菌内毒素 ≤5（EU/ml）

7、牛腹泻病毒 阴性

8、大肠杆菌噬菌体 阴性

9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线（接种浓度）最大增殖浓度≥2.5×106 个/ml

细胞倍增时间 ≤15h

克隆率 ≥85%

如此重要的胎牛血清当然价格也不会很低，怎么才能让它发挥最大作用呢？在使用的过程中都需要注意哪些呢？

1、注意避免沉淀加入培养液

添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液，因为如果培养液有沉淀的存在，会使得其中培养的细胞产生大量的黑点，除此之外，细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质，总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了最大程度减少血清的损失，可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理，之后便可将上清液加入培养液中使用。

2、注意解冻的方法

再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则，因此在解冻血清的时候，要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点，事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来，便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外最好采用国际通用的解方式解冻血清。

3、注意血清的灭活方法

胎牛血清的灭活，一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清，那么需要注意的是，加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做，是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求，客户可以自行选择是否进行灭火处理。