graphpad细胞增殖曲线_细胞增殖毒性检测试剂盒 (CCK8)

   水溶性四唑(2-(2-甲氧基-4硝基苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，被线粒体内的脱氢酶还原成橙黄色的水溶性的甲臜染料(formazan,下图)， 这种甲臜染料直接溶解在培养基中。水溶性四唑被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够。细胞增殖越多越快，则培养基的颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。正是利用这一特性开发的CCK-8试剂盒直接进行细胞增殖和毒性分析。 CCK-8法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。 CCK-8法与MTT比较： CCK8试剂盒提供了一种灵敏度高，操作简便，使用安全，重现性好的细胞增殖与活性检测方法。与传统的MTT相比无需有机溶剂和放射性同位素，步骤少，无损失，结果准确！本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。 1. MTT实验生成的甲臜不是水溶性的，需要使用DMSO等有机溶剂溶解；而本方法产生的甲臜是水溶性的，不仅省去了溶解的步骤，更因此而减少了该操作步骤带来的误差。 2. 与MTT方法相比，本方法线性范围更宽，灵敏度更高。 本方法对细胞无毒性，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数多次测定从而找到最佳测定时间。                                 3. 本方法所用试剂在培养基中比MTT更加稳定，实验效果重复性好。 4. MTT具有毒性，同时其生成的甲臜需要有机溶剂溶解，会对操作人员身体造成危害。本试剂无毒，使用中无需有机溶剂，操作更加安全。 5. 本试剂盒在4℃避光可长期保存，使用无需配制，即开即用。 6. 酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰(扣除空白孔即可) CCK-8 法与其他细胞增殖 / 毒性检测方法的优势比较

检测方法	MTT法	XTT法	WST-1法	CCK-8法
甲臜产物的水溶性	差需要加DMSO溶解	好	好	好
产品性状	粉末	2瓶溶液	溶液	1瓶溶液
使用方法	配成溶液后使用	现配现用	即开即用	即开即用
检测灵敏度	一般	较高	较高	高
重现性	差	中等	好	非常好
检测时间	较长	较短	较短	最短
检测波长	560-600nm	420-480nm	420-480nm	430-490nm
细胞毒性	高细胞形态完全消失	很低细胞形态不变	很低细胞形态不变	很低细胞形态不变
试剂稳定性	一般	非常差	一般	很好
批量样品检测	可以	非常适合	非常适合	非常适合
便捷程度	一般，工作量大