TUNEL
细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
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凋亡细胞的原位末断转移酶标记法
(TUNEL
法
细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是
;
细胞内源性核酸内切酶的激活而导
致核染色质
DNA
双链
的断裂。
大量
DNA
片段暴露出的
3
羟基在末断转移酶
(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT
或
DNA
多
聚酶的作用下
,
与生物素或地
高辛标记的核苷酸结合
,
最终借助与卵白素或抗地高辛抗体结合的荧光素或
HRP ,
使
凋亡细胞被特异性地标记和显示出来。
TUNEL
细胞凋亡试剂盒由美国罗氏公司提供
试剂
1:
酶浓缩溶液
(Enzyme Solution
试剂
2:
标记溶液
(Lable Solution
试剂
3:
转化剂
-POD (Converter-POD
酶标记抗荧光素抗体
(
即用型
试验所需其它试剂
:
非石蜡切片
:
·
冲洗缓冲液
:
磷酸盐缓冲液
(PBS
·
阻断溶液
:0.3%H2O2
甲醇溶液
·
固定溶液
:4%
多聚甲醛
(
溶剂
pH7.4
新鲜配制的
PBS
溶液
·
渗透液
:0.1%Triton
甔
-100(
溶于新鲜配制的
0.1%
枸橼酸钠溶液
Triton X-100(
聚乙二醇辛基苯基醚
名
:
曲拉通
X-100,
乳化剂
OP