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一步法
TUNEL
细胞凋亡检测试剂盒(FITC)使用说明
货号:
CA1040
规格:
25T/50T
保存:
-20℃保存,FITC-dUTP
需避光保存。如果频繁使用(一周内)
,5×Reaction
Buffer,FITC-dUTP
和抗荧光淬灭封片剂可
2-8℃保存。
产品简介:
一步法
TUNEL
细胞凋亡检测是一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经
过固定和洗涤的细胞或组织,
只要经过一步染色反应,
洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式
细胞仪检测到凋亡细胞。细胞在发生凋亡时,会激活一些
DNA
内切酶,这些内切酶会切断
核小体间的基因组
DNA。
细胞凋亡时抽提
DNA
进行电泳检测,
可以观察到
180-200bp
的
DNA
ladder。基因组
DNA
断裂时,暴露的
3’-OH
可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal
Deoxynucleotidyl
Transferase,TdT)
的
催
化
下
加
上
荧
光
素
(FITC)
标
记
的
dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是
TUNEL(TdT--mediated
dUTP
Nick-End
Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点:
(1)高灵敏度:可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有
DNA
断裂,
可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性:TUNEL
检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速:仅需约
1-2
个小时即可完成。
(4)方便:只需一步染色反应,洗涤后即可观察,不必使用二抗等进行多步操作。
(5)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的
贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL
法特异性检测细胞凋亡时产生的
DNA
断裂,
但不会检测出射线等诱导的
DNA
断
裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,
另一方面也不会