一、
ELISA
的原理
ELISA
的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗
原或抗体仍保持其免疫学活性,
酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,
又保留酶的活性。
在测定时,
受检标本
(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗
涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗
原或抗体,
也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一
定的比例。
加入酶反应的底物后,
底物被酶催化成为有色产物,
产物的量与标本中受检物质
的量直接相关,
故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高,
间接地
放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
二、
ELISA
的类型
ELISA
可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:
(
1
)固相的抗原或抗体,即
"
免疫吸附剂
"
(
immunosorbent
)
;
(
2
)酶标记的抗原或抗体,称为
“
酶联物
”
、
“
结合物
”
(
conjugate
)
;
(
3
)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不
同类型的检测方法。用于临床检验的
ELISA
主要有以下几种类型:
(一)
双抗体夹心法测抗原