5中sender方法介绍_方法确认报告中内标法与外标法介绍

在方法确认报告中，样品定量的检测方法分为内标法和外标法两种，这两种方法具体有何区别和优劣势呢？确定检测方法时应如何选择呢？

1．内标法和外标法的简介

内标法(Internal Standard Method)是将一定重量的纯物质作为内标物，加到定量的样品中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，计算出被测组分在样品中的含量。内标法是色谱分析中一种比较准确的定量方法，在没有标准物对照时，此方法颇具优越性。

外标法(external standard method)与内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质，且要求有较高的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。

2．内标法与外标法的优劣势

内标法

①内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。

②内标法的缺点是操作程序相对烦琐，不适合大批量试样的快速分析，对内标物的要求严格，有时不易寻找。

图1：内标法典型谱图

外标法

①操作简单，计算方便，外标法不使用校正因子，适用于大批量试样的快速分析，外标法适用于生产过程中的常规分析；

②仪器随着使用会有所变化，因此需要定期进行标准曲线校正；

③对进样量的准确性控制要求较高，否则容易造成分析误差。

图2 外标法典型谱图——标样

图3 外标法典型谱图——试样

3．如何选择内标法与外标法

一般来说，如果采用外标法能够满足要求时，首选外标法作为检测方法，这也是目前方法确认报告中的常用方法，液相色谱大多采用外标法定量。当有效成分必须采用气相色谱法检测时，以及在一个分析周期内不是所有组分都能流出色谱柱，或检测器不能对每个待测组分产生明显信号，例如顺式氯氰菊酯，由于有异构体成分不能明显出峰，所以采用内标法检测。这是由于对被测物定量时，内标物和样品一起进行检测，如果样品在处理过程中受到干扰，那么内标物也受到同样的影响，在对被测物定量计算时就可以同比例抵消这个干扰，提高检测结果的准确度。